技術文章
做全血DNA提取實驗時應該怎樣選擇抗凝劑
閱讀:4187 發布時間:2015-10-29在醫學實驗中常需動物的全身抗凝,采出的全血或血漿有的也需加入適當的抗凝劑抗凝。對抗凝劑的要求是:用量少、溶解度大、不帶進干擾實驗的雜質。
1.從全血中制備基因組DNA,ACD做為抗凝劑要優于EDTA,因為他更加能保存高分子質量的DNA,然而,血樣常常被收集于用定量EDTA作為抗凝劑的小管中。
2.在大多數美國的醫院中,收集血樣的小管均用顏色標明是否含有抗凝劑,紫色頂管蓋的小管一般含有抗凝劑,通常是EDTA的干粉。黃色頂蓋的小管不含抗凝劑。
3.在分子克隆實驗中,前者一般用于收集血樣用于制備基因組的DNA,后者用于收集血樣作為用EB病毒的永生化淋巴細胞的來源。這些永生化的細胞可以作為可更新的來源來制備大量的DNA以備后用,如進行遺傳學的研究等等!
注意事項:血液可以在0度條件下保存一周左右,或者是零下70度條件下無限期保存!做全血DNA提取的時候抗凝劑不能采用肝素!因為肝素是聚合酶鏈式反應的抑制劑!