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了解細(xì)胞計(jì)數(shù)及活率分析的意義與方法
1、細(xì)胞計(jì)數(shù)是確定樣品中細(xì)胞數(shù)量的過程,常見的細(xì)胞計(jì)數(shù)方法包括顯微鏡直接計(jì)數(shù)法、細(xì)胞計(jì)數(shù)板法、自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀法等。
顯微鏡直接計(jì)數(shù)法:
原理:利用顯微鏡直接觀察并計(jì)數(shù)細(xì)胞。
操作:將細(xì)胞樣品稀釋后置于載玻片上,加蓋玻片,在顯微鏡下觀察并計(jì)數(shù)。
優(yōu)缺點(diǎn):操作簡單,但結(jié)果受人為因素影響較大,且不適合大規(guī)模計(jì)數(shù)。
細(xì)胞計(jì)數(shù)板法:
原理:利用細(xì)胞計(jì)數(shù)板上的網(wǎng)格來輔助計(jì)數(shù)。細(xì)胞計(jì)數(shù)板是一種有兩個(gè)激光蝕刻網(wǎng)格的工具,用于在簡單的光學(xué)顯微鏡下計(jì)數(shù)取樣細(xì)胞。
操作:首先清潔計(jì)數(shù)板和蓋玻片,然后將細(xì)胞懸浮液滴加到計(jì)數(shù)室邊緣,使其自然流入并均勻分布在計(jì)數(shù)室內(nèi)。待細(xì)胞沉降后,在顯微鏡下選擇適當(dāng)?shù)姆礁襁M(jìn)行計(jì)數(shù)。
自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀法:
原理:利用圖像處理技術(shù)和高級算法自動識別并計(jì)數(shù)細(xì)胞。
優(yōu)點(diǎn):計(jì)數(shù)準(zhǔn)確、快速、自動化程度高,適合大規(guī)模計(jì)數(shù)。
應(yīng)用:如CountStar細(xì)胞計(jì)數(shù)儀等,可廣泛應(yīng)用于生物學(xué)、醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域。
2、細(xì)胞活率分析是評估細(xì)胞存活狀態(tài)的重要手段,常用的方法包括臺盼藍(lán)染色法、熒光染料法等。
臺盼藍(lán)染色法:
原理:活細(xì)胞具有選擇透過性,能夠排斥臺盼藍(lán)染料,而死細(xì)胞則因細(xì)胞膜受損而容易被染料著色。
操作:將細(xì)胞樣品與臺盼藍(lán)染料混合后,在顯微鏡下觀察并計(jì)數(shù)被染成藍(lán)色的細(xì)胞(死細(xì)胞)和未染色的細(xì)胞(活細(xì)胞)。
計(jì)算公式:細(xì)胞存活率 =(活細(xì)胞數(shù) / 總細(xì)胞數(shù))× 100%。
熒光染料法:
原理:利用熒光染料(如Calcein-AM、CFSE等)標(biāo)記活細(xì)胞,通過流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡檢測熒光信號來評估細(xì)胞活力。
優(yōu)點(diǎn):靈敏度高、可實(shí)時(shí)監(jiān)測細(xì)胞活力變化。
應(yīng)用:廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、遷移等研究領(lǐng)域。
Vi-CELL BLU 細(xì)胞計(jì)數(shù)及活率分析系統(tǒng)自動化了用于細(xì)胞計(jì)數(shù)和活率分析的細(xì)胞混勻和臺盼藍(lán)染色步驟。
系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)了從樣品制備到分析的全過程自動化,無需手動混樣、染色、上樣等步驟,極大地減少了人為操作誤差,提高了測試結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。
系統(tǒng)支持24位樣品盤或96深孔板進(jìn)樣,加快了樣品處理速度,提升了分析通量。同時(shí),提供標(biāo)準(zhǔn)測試和快速測試兩種模式,可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求靈活選擇,進(jìn)一步提高測試效率。
系統(tǒng)符合21 CFR Part 11合規(guī)性要求,支持電子簽名和數(shù)據(jù)加密存儲,保證了數(shù)據(jù)的完整性和安全性。用戶可以通過系統(tǒng)生成的活動和錯(cuò)誤日志進(jìn)行審計(jì)跟蹤,確保測試過程的可追溯性。