檢測水產呋喃它酮(AMOZ)ELISA法檢測試劑盒
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【詳細說明】
呋喃它酮(AMOZ)ELISA法檢測試劑盒
廣州健侖生物科技有限公司
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食品中肉質類瘦肉精系列檢測:微生物、化學有害物質、抗生素、水產、真菌毒素、獸藥殘留等
動物疫病系列檢測:牛羊豬犬禽病
化妝品系列檢測:重金屬
保健品系列檢測:非法藥類添加劑
農藥殘留系列檢測:糧食中農藥殘留
呋喃它酮(AMOZ)ELISA法檢測試劑盒
原理及用途
本試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測蜂蜜、魚、蝦、禽、肝臟等中的呋喃它酮代謝物(AMOZ),試劑盒由預包被偶聯抗原的酶標板、辣根酶標記物、抗體、標準品及其他配套試劑組成。檢測時,加入標準品或樣品溶液,樣本中的呋喃它酮代謝物和酶標板上預包被偶聯抗原競爭抗呋喃它酮代謝物抗體,加入酶標記物后,用TMB底物顯色,樣本吸光度值與其所含呋喃它酮代謝物含量成負相關,與標準曲線比較即可得出樣本中呋喃它酮代謝物的殘留量。
2 技術指標
2.1 試劑盒靈敏度:0.05ppb(ng/ml)
2.2 反應模式:25℃,45min~15min
2.3 檢測下限:
組織、肝臟…………………………0.1ppb
蜂蜜、牛奶、腸衣…………………0.1ppb
奶粉、蛋粉、飼料…………………0.1ppb
魚/蝦等水產品組織因有一定干擾,定量下限為0.15ppb
5.3.1 牛奶樣本處理方法
1)取5ml樣本于離心管中,加250ul 亞硝基溶液(配液1)振蕩混合30秒,加250ul 硫酸鋅溶液(配液2)振蕩混合30秒,15℃4000轉/分離心10分鐘;
2)取上清1.1ml,加4ml去離子水、0.5 ml 1M 鹽酸溶液和100μl衍生化試劑,振蕩5分鐘;
3)在37℃過夜孵育(約16小時)或50℃(超過50℃時會影響分層效果)水浴孵育3小時;
4)分別加入5ml 0.1M K2HPO4 溶液,0.4ml 1M NaOH溶液和5ml的乙酸乙酯,振蕩5分鐘;
5)室溫下4000轉/分,離心10分鐘;
6)取出2.5ml的上層液到另一個離心管中,50-60℃氮氣或空氣吹干;
7)用1ml正已烷溶解殘留物,加入1ml復溶工作液充分振蕩混合30秒;室溫4000轉/分,離心10分鐘;
8)去除上層正已烷,取50μl下層液用于分析。
樣本稀釋倍數為2 檢測下限:0.1ppb
5.3.2 奶粉、蛋粉樣本處理方法
1)稱取1±0.05g均質樣于離心管中,加入4ml去離子水、0.5 ml 1M 鹽酸溶液和100μl衍生化試劑,振蕩5分鐘;
2)在37℃過夜孵育(約16小時)或50℃(超過50℃時會影響分層效果)水浴孵育3小時;
3)加250ul 亞硝基溶液(配液1)振蕩混合30秒,加250ul 硫酸鋅溶液(配液2)振蕩混合30秒,15℃4000轉/分離心10分鐘;
4)取全部上清到另一個離心管中,后續接“5.3.1 牛奶樣本處理方法,4)”
5.3.3 蜂蜜、組織、腸衣、肝臟、飼料、雞蛋樣本處理方法
1)稱取1±0.05g均質樣于離心管中,加入4ml去離子水、0.5 ml 1M 鹽酸溶液和100μl衍生化試劑,振蕩5分鐘;
2)后續接“5.3.1 牛奶樣本處理方法,3)”
5.3.4 熟食樣本處理方法
1)稱取1±0.05g均質樣于50ml離心管中,加入4.5ml甲醇和0.5ml去離子水,振蕩2min,室溫4000轉/分,離心5分鐘,去除全部液體;
2)加入5ml乙氰和5ml正己烷,振蕩2min,室溫4000轉/分,離心5分鐘,去除全部液體;
3)在沉淀中加入4ml去離子水、0.5 ml 1M 鹽酸溶液和100μl衍生化試劑,振蕩5分鐘;
8 注意事項
8.1 室溫低于25℃或試劑及樣本沒有回到室溫(25℃)會導致所有標準的OD值偏低。
8.2 在洗板過程中如果出現板孔干燥的情況,則會出現標準曲線不成線性,重復性不好的現象。所以洗板拍干后應立即進行下一步操作。
8.3 混合要均勻,洗板要*,在ELISA分析中的再現性,很大程度上取決于洗板的*性。
8.4 在所有孵育過程中,用蓋板膜封住微孔板,避免光線照射。
8.5 不要使用過了有效期的試劑盒,不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。
8.6 顯色液若有任何顏色表明變質,應當棄之。0標準的吸光度值小于0.5個單位(A450nm< 0.5 )時,表示試劑可能變質。
8.7 反應終止液有腐蝕性,避免接觸皮膚。
9 貯藏及保存期
儲藏條件:試劑盒于2-8℃保存,避免冷凍。
保 質 期:該產品有效期為1年,生產日期見包裝盒
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