示差折光檢測器和紫外檢測器、蒸發光散射檢測器一樣,也是液相色譜儀常用的檢測器之一。由于各種物質具有不同的折射率,溶劑和樣品各組分折射率存在一定差異,所以通過檢測折射率的變化,就可以達到分析樣品組分的目的。
使用示差折光檢測器要注意以下幾點:
1.正確放置溶劑瓶和廢液瓶
要把溶劑瓶和廢液瓶放在比示差折光檢測器和容劑泵還要高的位置,這樣可以使樣品池有一定壓力,有利于優化檢測器的性能。
2.循環使用流動相
建議循環使用流動相。在沒有進行分析時,打開循環閥,讓流動相進行循環,這樣泵就可以連續運行不必停止,一直到進行下一個分析。這樣操作不僅可以節省流動相,而且檢測器可以連續穩定的運行,隨時進行樣品分析。
3.示差折光檢測器不能用做梯度洗脫
由于介質的改變和壓力的波動都會影響基線的穩定性,所以使用示差折光檢測器時不能進行梯度洗脫。
4.保證檢測器的溫度恒定
光學系統和流動相的溫度對基線的穩定性影響很大。示差折光檢測器可在比室溫高5℃到55℃的范圍內控溫。建議將溫度設為比室溫高5℃,并確保柱溫箱的溫度與檢測器保持一致。溫度不宜過高,因為介質的折光指數隨溫度升高而降低,溫度過高會使靈敏度降低。
5.不可讓流通池承受過大的壓力
示差折光檢測器流通池的反壓約為5bar,如果還要在系統里廉潔其他檢測器或餾分收集器,必須將它們連接在示差折光檢測器之前。即示差折光檢測器在流路系統里必須放在最后,以防壓力增大時損壞流通池。
6.某些溶劑隨長時間存放而改變會造成基線的漂移
例如乙腈/水的混合物中乙腈的含量會降低,四氫呋喃會變成過氧化物,在吸濕性有機溶劑中的水量會增加,而保存在參比流通池中的溶劑如四氫呋喃會產生氣體。
7.避免流動相和特定的色譜柱反應
某些流動相和特定的色譜柱反應,會產生長時間的噪聲,例如乙腈/水流動相和氨丙基鍵合固定相在一起會出現這一現象。要判斷長時間的噪聲是否是由流動相/色譜柱的反應而產生,應該使用限流毛細管代替色譜柱,考查示差折光檢測器的性能。
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