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當(dāng)前位置:> 供求商機(jī)> 進(jìn)口氨基酸分析儀-飼料行業(yè)氨基酸檢測(cè)方案
貨物所在地:天津天津市
所在地: 美國(guó)
更新時(shí)間:2024-06-03 08:45:27
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隨著我國(guó)飼料工業(yè)的發(fā)展,魚(yú)粉的需要量逐年增加,魚(yú)粉的質(zhì)量問(wèn)題越來(lái)越引起飼料行業(yè)、養(yǎng)殖業(yè)的重視。魚(yú)粉是水產(chǎn)飼料的主要蛋白源,尤其含有動(dòng)物生長(zhǎng)所必需的氨基酸,由于魚(yú)粉用量大,價(jià)格高,有些廠家摻雜使假、以次充好,使魚(yú)粉質(zhì)量參差不齊,這一行為業(yè)給魚(yú)粉品質(zhì)分析帶來(lái)了一定困難。因此,有必要建立一個(gè)有效的手段對(duì)魚(yú)粉中氨基酸進(jìn)行定量分析。
以下是譜祥利用LC高效液相色譜儀對(duì)魚(yú)粉進(jìn)行的HPLC檢測(cè)方案。
1、儀器與試劑
1.1儀器、設(shè)備
高效液相色譜儀
SMA 色譜柱AA:250mm×4.6mm×5μm
分析天平
恒溫箱,溫度控制在110±1℃
微量進(jìn)樣器,(20μL)一支
漩渦混勻器
氮吹儀
針頭過(guò)濾器
微孔濾膜:0.45µm
1.2試劑
鹽酸溶液,6mol/L:將優(yōu)級(jí)鹽酸與水按1:1(V/V)混合。
氨基酸標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。
乙腈,色譜。
三水合醋酸鈉,優(yōu)級(jí)。
冰醋酸。
正己烷,色譜。
2、供試品溶液和對(duì)照品溶液的制備
對(duì)照品溶液的制備 取氨基酸混合工作標(biāo)液500ul,用水稀釋至5ml,即得。
供試品溶液的制備 稱(chēng)取試樣50-100mg(準(zhǔn)確至0.1mg)于據(jù)塞試管中,加入6.0mol/l鹽酸10ml,混勻,充分提取10min,蓋緊蓋子。將樣品置于110℃恒溫干燥箱中,水解22-24h。冷卻后充分混勻,過(guò)濾。根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求移取適量上清液,60℃下氮?dú)獯蹈?,備用。以下按照衍生方法包進(jìn)行。
方法包衍生方法:將恒溫水浴鍋預(yù)熱至50±1℃,分別將A、B兩種衍生試劑用稀釋至原來(lái)濃度的1/5倍。精密量取上述對(duì)照品1ml,至于試管中,加入稀釋后的A溶液0.5ml和稀釋后的B溶液0.5ml,搖勻;在50±1℃的水浴中加熱45分鐘,取出,加入正己烷溶液1ml,振搖;并用孔徑為0.45μm有機(jī)膜過(guò)濾,放置30min后,取澄清的下層液進(jìn)行分析實(shí)驗(yàn)。供試品的衍生步驟與對(duì)照品相同。
3、色譜條件
色譜柱:AA 4. 6 mmx250 mm,粒度5 µm
流動(dòng)相:
流動(dòng)相A:0.1mol/L醋酸鈉溶液(pH6.5):乙腈=93:7
配置方法:準(zhǔn)確稱(chēng)取三水合醋酸鈉13.6g于1000ml水中,攪拌均勻,溶解,用冰醋酸或氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至6.5; 準(zhǔn)確量取配制好的三水合醋酸鈉溶液465ml和乙腈35ml,混合均與,抽濾,過(guò)0.45μm濾膜。
流動(dòng)相B:水:乙腈=20:80。
配制方法:準(zhǔn)確量取水100ml和乙腈400ml,混合均勻,抽濾,過(guò)0.45μm濾膜。
波長(zhǎng):254nm
流速:1. 0 mL/min
梯度設(shè)置:
T(min) | A% | B% |
0.01 | 100.0 | 0.0 |
11 | 93.0 | 7.0 |
13.9 | 88.0 | 12.0 |
14 | 85.0 | 15.0 |
29 | 66.0 | 34.0 |
32 | 30.0 | 70.0 |
35 | 0.0 | 100.0 |
42 | 0.0 | 100.0 |
45 | 100.0 | 0.0 |
60 | 100.0 | 0.0 |
4、測(cè)定法
分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各20ul,注入液相色譜儀,測(cè)定,即得
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