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色譜柱: | Inertsil ODS-4 3um 4.6*150mm 貨號:5020-04045 |
流動相: | A:水(40mM磷酸鹽,Ph7.0) B:乙腈/甲醇/水=45:45:10 |
流速: | 1.0ml/min |
柱溫: | 40℃ |
檢測器: | UV,262nm、338nm |
進樣量: | 1ul |
衍生劑配制方法: | |
OPA配制: | 10mgOPA溶于1ml溶液(0.16ml甲醇+0.14ml硼酸緩沖液+0.7ml純水) |
3-巰基丙酸: | 10ul 3-巰基丙酸用純水稀釋至1ml |
硼酸緩沖液: | 0.1mol/L,用0.4mol/L的氫氧化鈉調節(jié)pH值至10 |
FMOC: | 10mgFMOC溶于1ml乙腈 |
梯度條件,見表1: |
time(min) | Module | Command | Value |
---|---|---|---|
2.5 | pumps | pump B Conc | 13 |
2.51 | pumps | pump B Conc | 15 |
10 | pumps | pump B Conc | 16 |
15 | pumps | pump B Conc | 35 |
26 | pumps | pump B Conc | 42 |
26.01 | pumps | pump B Conc | 100 |
29.5 | pumps | pump B Conc | 100 |
29.51 | pumps | pump B Conc | 12 |
35 | controller | stop |
圖譜1
峰號 | RSD%(RT) | RSD%(Area) |
---|---|---|
1 | 0.16 | 1.84 |
2 | 0.05 | 2.18 |
3 | 0.1 | 0.72 |
4 | 0.09 | 0.70 |
5 | 0.08 | 1.09 |
6 | 0.09 | 1.07 |
7 | 0.09 | 0.73 |
8 | 0.1 | 0.85 |
9 | 0.1 | 1.03 |
10 | 0.06 | 0.66 |
11 | 0.04 | 0.87 |
12 | 0.06 | 0.88 |
13 | 0.06 | 0.65 |
14 | 0.07 | 0.97 |
15 | 0.09 | 0.86 |
16 | 0.05 | 0.67 |
17 | 0.09 | 0.77 |
18 | 0.11 | 0.93 |
圖2 保留時間與峰面積重現性圖譜
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