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ELISA試劑盒測定現通常為采用手工操縱的以微孔板條為固相的測定模式,測定操縱非常簡 樸,一般涉及到標本的收集保留、試劑預備、加樣、溫育、洗板、顯色、比色、結果判定和結果講演及解釋等方面,其中任一步驟的不當都會影響測定結 果,ELISA試劑盒且尤以加樣、溫育和洗板等步驟為甚。濺出會對臨近孔產生污染。
因此,在使用間接法測定IgM抗體時,通常須將血清樣本用抗人IgG抗體或A預處理,以去除IgG的干擾。這樣不但測定較為繁瑣,而且影響測定的特異性和靈敏度。目前,常用的IgM抗體檢測方法為捕獲法,即以抗人IgM抗體(抗人u鏈)作為固相抗體,ELISA試劑盒當加入血清標本時,其中的IgM類抗體(特異的和非特異的)即可被固相抗體捕獲,再加入特異抗原,其與固相上捕獲的IgM抗體結合后,加入酶標抗特異抗原的抗體,zui后加入底物顯色。
用于傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標志物和特種蛋 白等的檢測的血清標本的收集則沒有時間和體位方面的影響。ELISA試劑盒作為一種固相免疫測定,抗原抗體的結合反應在固相長進行, ELISA試劑盒要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原*結合,必需在一定的溫度前提下反應一定的時間。得到*科研工作者的認可及推崇,在歐美及中國 獲得很大的推廣,尤其是國內生化領域的長足發展。
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