細胞ERK1/2激酶總活性光度法定量檢測試劑盒的用途和注意事項
主要用途
細胞ERK1/2激酶總活性光度法定量檢測試劑是一種旨在通過多肽底物,在ERK1/2激酶敏感性抑制劑存在與否的情況下,受到ERK1/2激酶磷酸化后,進而由丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶連續循環法反應系統,測定產生ADP過程中,伴隨的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)的氧化反應, 即采用光度法測定其氧化后吸光峰值的變化,以分析細胞裂解樣品中ERK1/2激酶總活性而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種細胞裂解萃取液樣品(動物、人體)、部分或*純化酶樣品中ERK1/2激酶的定量檢測,以及抑制劑和激活劑的篩選。產品嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩定,高度敏感。
注意事項
1. 本產品為20次操作
2. 操作時,須戴手套
3. 系統操作過程中,背景測定只需1次
4. 樣品處理忌用磷酸緩沖溶液
5. 樣品須澄清,至關重要
6. 加入樣品啟動反應后3秒內即刻光度測定
7. 建議使用比色皿測定
8. 測定值由高到低變化;測定可持續30分鐘
9. 光度測定后,比色皿須清洗*
10. 樣本測定0分鐘讀數高于5分鐘讀數表明具有酶活性
11. 樣本測定讀數持續上升,表明酶活過低或樣品量過低
12. 非特異活性高于總活性,表明特異性酶活過低或樣品量過低
13. 建議待測樣本蛋白濃度為100微克/10微升(本公司提供 Bradford蛋白質濃度定量試劑盒-GMS30030.1)
14. 如果待測樣品濃度過高或過低,可以調整樣品濃度
15. ERK激酶活性單位濃度定義:在30℃溫度下,pH 7.5條件下,每分鐘內能夠氧化1微摩爾還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)所需的酶量作為一個活性單位
16. 本公司提供系列蛋白激酶檢測試劑產品
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