色譜是一種分離分析手段,分離是核心,因此擔負分離作用的色譜柱是色譜系統的心臟。對色譜柱的要求是柱效高、選擇性好,分析速度快等。GPC色譜柱由柱管、壓帽、卡套(密封環)、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成,壓力不高于70kg/cm2時,也可采用厚壁玻璃或石英管,管內壁要求有很高的光潔度。為提高柱效,減小管壁效應,不銹鋼柱內壁多經過拋光。
下面要為大家介紹GPC色譜柱的再生:
1、正相柱再生。順次以正己烷、異丙醇、二氯甲烷、甲醇作流動相沖洗色譜柱每步注意平衡溶劑的順序,不要顛倒每種流動相流經色譜柱的量為20-30倍柱體積(因異丙醇的粘度較大,沖洗過程中請隨時注意調整沖洗的流速),用甲醇沖洗完后,再以相反的順序沖洗色譜柱。要注意上述溶劑必需嚴格脫水。
2、反相柱的再生。采用以甲醇:水=95:5(V/V),純甲醇,二氯甲烷等溶劑作流動相,順次沖洗,每種流動相流經色譜柱的量為20一30倍色譜柱體積然后再以相反順序沖洗色譜柱。
3、離子交換柱的再生。長時間在高pH值和高離子強度緩沖溶液中使用,將導致色譜柱離子交換能力降低。用稀酸緩沖溶液沖洗,可使陽離子柱再生;反之,用稀堿緩沖溶液沖洗,可使陰離子柱再生。
流動相使用前需用微孔濾膜過濾,消除流動相中顆粒對色譜系統和色譜柱的損壞。緩沖液與其他流動相混合后應重新過濾避免溶解度變化造成產生新的沉淀。不應使用純水作為流動相沖洗,以免柱性能損壞(添加5%的有機溶劑沖洗色譜柱,同時可以達到對緩沖鹽清洗的作用。還可以使其更容易平衡)。
希望上述內容能夠幫助大家更好的了解本色譜柱。
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