液相色譜儀是高精密儀器,對其操作有著比較嚴格的要求,如果在使用過程中不按照正確操作的話,很容易導致二手液相色譜儀出現一些故障。下面介紹幾種日常操作中液相色譜儀常見故障和解決方法。
1、出現肩峰或分叉
出現肩峰或分叉的原因有很多,需逐一分析,如果是因為樣品體積過大,那么用流動相配樣,總的樣品體積小于*峰的15%;如果樣品溶劑過強,則采用較弱的樣品溶劑;如果是因為柱塌陷或形成短路通道,就需要更換色譜柱,采用較弱腐蝕性條件;如果是柱內燒結不銹鋼失效,則需要更換燒結不銹鋼,加在線過濾器,過濾樣品;如果是進樣器損壞,那就需要更換進樣器轉子。
2、儀器柱壓高
導致柱壓高的原因一般有兩種,一是緩沖液鹽分沉積在柱內,一是樣品污染沉積。解決方法兩種情況不一樣。對*種情況,處理方法一般是先用40~50℃的純水,低速正向沖洗柱子,待柱壓逐漸下降后,相應提高流速沖洗,柱壓大幅度下降后,用常溫純水沖洗,之后用純甲醇沖洗柱子30分鐘。對于第二種情況由樣品的沉積引起污染的C18柱,和純水反向沖洗柱子,換成甲醇沖洗,接著用甲醇+異丙醇(4+6)沖洗柱子,再用換成甲醇沖洗,然后用純水沖洗,zui后甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘以上。
3、峰面積重復性不佳。
出現峰面積重復性不佳的原因可能是進樣閥漏液或者加樣針不到位。如果是進樣閥漏液,解決方法比較簡單,更換進樣閥墊圈就行;如果是加樣針不到位對,只要保證加樣針插到底,注射樣品溶液后須快速、平穩地從LOAD狀態轉換到INJECT狀態,以保證進樣量的準確就可以了。
4、基線噪聲
出現基線噪聲的原因有很多,如果是氣泡(尖銳峰),二手島津色譜儀那么就需要流動相脫氣,加柱后背壓;如果是污染(隨機噪聲),應當清洗柱,凈化樣品,用HPLC級試劑;如果是檢測器燈連續噪聲,更換氘燈就行;如果是電干擾(偶然噪聲),則需要采用穩壓電源,檢查干擾的來源(如水浴等)。