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MTF比色法測定slL-1的生物活性
閱讀：1355 發布時間：2011-12-17四甲基偶氮唑鹽[3—（4.5-dimethylthiazol-2-Y1）-2，5-diphenyltetmzolimnbromide，MTF）在活細胞線粒體的琥珀酸脫氫酶作用下，被還原成藍黑色的MTr-甲脂，形成MTr-甲鐕的量與細胞增殖程度呈正相關。故通過測定細胞形成MTF-甲鐕量，可間接定量分析細胞的增殖情況，具體步驟如下：
（1）用PBS溶解MTT為5mg／mL，用0．22／zm膜濾器除菌及雜質。
（2）加MTF至培養的細胞及IL-1樣品中，10uL／孔，37~C溫育4ho
（3）于每孔加酸化異丙醇100t~L／孔，充分混勻以溶解底物。酸性條件使培養液中酚紅指示劑變為黃色，以利于對MTr-甲脂轉化物的測定。
（4）將微量測定板置室溫數分鐘，保證轉變的底物結晶被溶解。
（5）置酶標儀，調整檢測波長為570nm，參考波長為630nm。測定應在酸化異丙醇加入后1h內完成。