C8反相液相色譜柱的構成及平衡、再生和維護
C8反相液相色譜柱主要由不銹鋼制成。
現在流行兩種主要的液相色譜柱的式樣,關鍵部件卡套有些不同。
一種式樣是螺母、卡套全套在柱管上,分配器和燒結過濾板按順序放在尾部接頭內。擰緊螺母和尾部接頭,卡套一次成型緊緊咬住柱管外壁,起到很好的密封作用。分配器使得高壓流動相不集中在一點沖擊柱床,又能把由流動相帶來的樣品分散到柱頭上均勻分離,形成對稱的色譜峰。燒結過濾板的孔徑<5微米,除了能緩和高壓流動相對固定相的沖擊,也擋住了污染物進入色譜柱柱頭。
C8反相液相色譜柱的維護:
1.色譜柱的平衡
反相色譜柱由工廠測試后是保存在乙腈/水中的。新柱應先使用10-20倍柱體積的甲醇或乙腈沖洗色譜柱。
2.色譜柱的再生
長期使用的色譜柱,往往柱效會下降(柱子的理論塔板數減低)。可以對色譜柱進行再生,在有條件的實驗室應使用一個廉價的泵進行柱子的再生。建議用來沖洗柱子的溶劑體積。
3.色譜柱的維護
a.使用預柱保護分析柱(硅膠在極性流動相/離子性流動相中有一定的溶解度)
b.大多數反相色譜柱的pH穩定范圍是2-7.5,盡量不超過該色譜柱的pH范圍
c.避免流動相組成及極性的劇烈變化
d.流動相使用前必須經脫氣和過濾處理
e.如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動相,應在實驗完畢柱子沖洗干凈,并保存于甲醇或乙腈中
f.氯化物的溶劑對其有一定的腐蝕性,故使用時要注意,柱及連接管內不能長時間存留此類溶劑,以避免腐蝕。