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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 96T |
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貨號 | RE52001 | 應用領域 | 醫療衛生 |
主要用途 | 用于人血清中抗精子表面抗原自身抗體體外定性檢測 |
通用名稱:抗精子抗體IBL試劑盒(酶聯診斷)
英文名稱:Spermatozoa-Ab ELISA
產品規格:96T
產品貨號:RE52001
產品品牌:德國IBL
注冊證號:國械注進20142405077
抗精子抗體試劑盒(酶聯免疫法)
抗精子抗體IBL試劑盒(酶聯診斷)是科潤達生物公司提供的進口試劑盒,有注冊證,可用于臨床使用。抗精子抗體試劑盒采用的是ELISA檢測方法,該方法檢測時間較短,操作起來簡單方便,無需特殊儀器,本產品的靈敏度高、特異性強,最多可同時檢測96人份,可更多的節約時間成本,此外公司還提供代測服務,并且提供完整的數據報告。抗精子抗體(AsAb)是一個復雜的病理產物,男女均可罹患。男性的精子、精漿,對女性來說皆屬特異性抗原,接觸到血液后,男女均可引起免疫反應,產生相應的抗體,阻礙精子與卵子結合,而致生育方面的困擾。
預期用途:用于人血清中抗精子表面抗原自身抗體體外定性檢測。可用于臨床使用。
背景簡介
在西方國家,不孕夫婦的比例占總人群的10~15%(Haas et al,1980)。目前人們還不能精確的知道由免疫學因素導致不孕的發病率是多少。由于有很多不同的檢測方法,人們對抗精子抗體在不孕中的作用存在著很大爭議。在檢測抗精子抗體的傳統檢測方法中,精子凝集檢測和精子固定檢測已被廣泛應用。這些方法及其它凝集檢測都很耗費時間,并且結果與其操作不協調。與傳統的檢測方法相比,用ELISA檢測抗精子抗體具有很多優點。IBL公司的抗精子抗體ELISA試劑盒結合這些優點,并同時還具有高靈敏度和高特異性的特點。
檢測原理
抗精子抗體IBL試劑盒(酶聯診斷)利用的是非競爭性的原理。包被在微孔中的精子表面抗原是從池子中提取到的,它采用的方法是Alexander在1984年所提及到的那種方法。將疑似免疫學不孕病人的血清(已稀釋好)加入到包被孔中溫育,之后洗板,再加入過氧酶標記的抗人免疫球蛋白(IgA,IgG和IgM)并溫育。溫育后洗板,再加入TMB底物液,并酶標儀檢測所顯示的顏色強度。微孔中所顯示的顏色強度與結合的免疫球蛋白濃度成正比。實驗結果可從標準曲線上讀取,結果單位為units/ml。
試劑盒組成成分
名稱 | 數量 | 成分 |
微孔板 | 12×8孔 | 微孔中包被了精子表面抗原。 |
標準品 | 3支凍干粉 | 將每支凍干粉溶解于1ml的洗滌液中。重新配制好的標準品(標準品S5)100μl內含500mU抗精子抗體。 |
酶聯物 | 100μl | 601倍濃縮,內含HRP標記的抗人IgG、IgA、IgM,使用前用稀釋液按1:601的比例進行稀釋。 |
底物液 | 12ml | 即用 |
終止液 | 12ml | 即用 |
洗滌液 | 50ml | 20倍濃縮,用雙蒸水按1:20的比例稀釋,配置好的洗滌液在2-8℃的環境下可穩定存放4周。 |
稀釋液 | 3瓶凍干粉 | 將每瓶溶于20ml洗滌液中制成稀釋液。 |
質控血清 | 3瓶凍干粉 | 將每瓶溶于1ml洗滌液中。 |
儲存條件
抗精子抗體IBL試劑盒(酶聯診斷)應當2~8℃的環境下運輸。微孔板條一但被拆開,應當將其重新密封好。拆開了板條儲存于2~8℃的環境下時,其免疫活性可穩定6周。
樣本要求
按照一般原則進行靜脈采血。不要使用明顯溶血、黃疸血和脂血樣品。采集的樣品存放于2~8℃的環境下時,必須在24小時內將其檢測掉。如果想將血清存放更長時間,可以將血清凍存于-20℃的環境下,避免反復凍融。
用稀釋液將病人樣品按1:51的比例進行稀釋(例如:10μl樣品+500μl稀釋液),混合均勻。稀釋好的樣品于2~8℃下可保存24小時。
檢驗方法
實驗開始前將所需數目的板條和所有試劑都平衡到室溫。試劑盒可分3次進行檢測,下面所述體積可用來檢測4條包被板條(32個檢測孔)。如果實驗中需使用更多板條,則體積應當相應的進行改變。
洗滌液
將30ml濃縮的洗滌液中加入到600ml雙蒸水中。配置好的洗滌液在2-8℃的環境下可穩定存放4周。冷藏時溶液會出現磷酸鹽沉淀物,室溫下又會溶解。
稀釋液
每支凍干的稀釋液中加入到20ml即用型的洗滌液中。配置好的稀釋液在2-8℃的環境下可穩定存放2天,如果凍存于-20℃的環境下則可存放更長時間。標準品、質控血清
檢測步驟
1、加100μl標準品、質控品和樣本于相應反應孔中
2、封板后37℃溫育60分鐘。
3、每孔用250μl洗滌液洗板3次(建議您使用洗板機),吸水紙上拍干。
4、在每一微孔中加入100μl酶聯物。
5、封板后37℃溫育60分鐘。
6、每孔用250μl洗滌液洗板3次
7、在每一微孔加TMB底物液100μl。
8、室溫(18℃~24℃)溫育10-15分鐘。
9、每孔加100μl終止液以終止底物反應,輕輕振板以使溶液混合均勻。
10、加終止液后30min內在450nm讀取OD值。(參照波長:600~650nm)
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