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供貨周期 | 一個月 | 應用領域 | 醫療衛生,生物產業,制藥,綜合 |
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人骨橋蛋白(OPN)酶聯診斷試劑盒
【簡介】
骨橋蛋白(OPN)來源于骨基質,是一種分泌型糖蛋白。目前已發現多個細胞分泌高酸性的鈣結合的糖基化磷蛋白,包括骨細胞,腎小管細胞,巨噬細胞,活化的T細胞和血管平滑肌細胞。分子量的大小取決于其糖基化和磷酸化程度,范圍為66~44kDa
OPN的一個重要特點是含有精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)序列,如纖維蛋白,連蛋白和其他胞外蛋白,通過該序列可與細胞表面整合素受體結合,如αvβ3
另一重要特點,由于RNA連接,糖基化,磷酸化,硫酸化和對蛋白酶的敏感度不同,OPN在機體內以多種分子形式存在。OPN和凝血酶同時存在于受傷,炎癥,血管再生和腫瘤組織位點。OPN易水解,這一過程可能有著重要的生理學意義。OPN片段的氨基末端含有一個隱藏的結合位點,可識別整合素α9β1,而且OPN還含有多個細胞結合位點,與多個受體反應;這些反應都有著不同的功能
【實驗原理】
OPN骨橋蛋白檢測試劑盒根據酶免法的夾心原理,利用兩種不同的高特異性抗體,TMB作為著色劑,顏色強度與人OPN的量成正比
兩種抗體如下:
包被抗體:抗人OPN(O-17)兔IgG,抗體反應部分,人OPN的N-端標記抗體
HRP標記的抗人OPN(10A16)小鼠IgG Fab’, 抗體反應部分,人OPN凝血酶裂解位點的右側
【檢測范圍】
5~320ng/mL(76.9~4920pmol/mL)
【預期用途】
OPN骨橋蛋白檢測試劑盒僅供研究,不能用于診斷
人盒可用于EDTA-血漿,尿液或細胞上清中人OPN的體外定量檢測。由于OPN分子是不穩定的蛋白,請在使用前將其儲存于-80℃,放置室溫或反復凍融會使檢測值降低
建議EDTA-血漿樣品用EIA緩沖液或PBS5~10倍的稀釋,如果5~10倍的稀釋還是超出了zui高標準品值,則需進一步稀釋
血清或肝素血漿樣品的檢測結果可能不是正確值,因為OPN不穩定,易被凝血酶裂解,而且OPN分子上有若干個肝素結合位點,所以肝素血漿也會影響試驗
建議尿液樣品用EIA緩沖液或PBS200倍稀釋,但各實驗室應*化稀釋率。由于尿液樣品易分解,建議加入PMSF(蛋白酶抑制劑)等。樣品采集后不能立即檢測,應貯存于-80℃或更低,避免反復凍融,否則其檢測值降低。尿液中OPN的量與尿液的體積成反比,建議用肌酸酐補償進行檢測
細胞上清的稀釋比例因細胞而異,各實驗室以*化稀釋比例稀釋
人盒不能檢測凝血酶裂解的人OPN
重組的和天然的人OPN都可用此試劑盒檢測
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