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技術文章
免疫組化筆Pap Pen使用方法
點擊次數:8619 發布時間:2015-5-8
免疫組化筆Pap Pen使用方法:
1. 新筆的筆尖上沒有油,*次使用時,須先把筆尖靠在玻璃上將筆筒往下輕壓(不能過重以防油過多流出),使得筆筒內的油流出,濕潤筆尖,即可正常使用。
2. 石蠟組織切片的畫圈:切片脫蠟水化,PBS沖洗,甩干PBS液,在組織片周圍畫圈,油圈距離組織片邊緣2-3mm;在使用實驗用免疫組化筆畫線之前,先用吸水紙將切片周圍擦干。所畫的圈應在室溫下干燥1-2分鐘后再進行下一步操作流程。如果需要使用胰蛋白酶或其它蛋白酶消化或者進行抗原熱修復處理切片,應待這些步驟完成后再使用實驗用免疫組化筆。
3. 冰凍切片的畫圈:將載玻片清洗干凈,用防脫片劑(如Poly-L-Lysine或APES)防脫處理,切片、貼片,PBS浸洗組織片,甩干PBS液,在組織片周圍畫圈,畫圈距離組織邊緣2-3mm;在使用實驗用免疫組化筆畫線之前,先用吸水紙將切片周圍擦干。所畫的圈應在室溫下干燥1-2分鐘后再進行下一步操作流程。如果需要使用胰蛋白酶或其它蛋白酶消化或者進行抗原熱修復處理切片,應待這些步驟完成后再使用實驗用免疫組化筆。
4. 細胞培養皿培養玻片的畫圈:以PBS清洗培養皿內培養玻片上的細胞后,傾去PBS緩沖液,用實驗用免疫組化筆直接畫于培養皿培養玻片的細胞培養面。在使用實驗用免疫組化筆畫線之前,先用吸水紙將切片周圍擦干。所畫的圈應在室溫下干燥1-2分鐘后再進行下一步操作流程。一次性細胞培養皿染色結束后不宜用二甲苯透明(可重復使用的玻璃材質的培養皿或玻璃材質的培養玻片可以),可用甘油類或水溶性封片劑直接滴加于染色的細胞上,再行封片。