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北京西美杰科技有限公司
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更新時(shí)間：2024-06-14 15:50:07瀏覽次數(shù)：192
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耐高鹽全能核酸酶DENARASE® High Salt
DENARASE® High Salt 是一種經(jīng)過(guò)生物工程改造的野生型 Serratia marcescens 內(nèi)切酶，通常用于生物工藝中的 DNA 去除。與野生型 DENARASE® 相比，該酶的幾個(gè)氨基酸被替換以提高其耐鹽性，而不會(huì)失去其對(duì)核酸的特異性。DENARASE® High Salt 在更廣泛的鹽濃度和 pH 范圍內(nèi)保持更高的活性，為客戶提供了更大的工藝靈活性，同時(shí)為病毒載體制造工藝提升成本效益，尤其是在需要較高鹽濃度的條件下。由于與野生型核酸內(nèi)切酶具有很高的相似性，DENARASE® High Salt 可以使用與野生型酶相同的核酸內(nèi)切酶 ELISA試劑盒進(jìn)行檢測(cè)，例如DENARASE® ELISA試劑盒，Cygnus核酸內(nèi)切酶殘留檢測(cè)試劑盒（EonucleaseGTP ELISA，貨號(hào)F960）。
DENARASE® High Salt的生產(chǎn)采用c-LEcta成熟的專''利DENARASE®生產(chǎn)工藝，該工藝采用革蘭氏陽(yáng)性芽孢桿菌菌株（Bacillus.sp.）表達(dá)，大大降低了內(nèi)毒素殘留風(fēng)險(xiǎn)。該酶按照ISO 9001標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)，不使用抗生素和動(dòng)物源性原料或TSE/BSE風(fēng)險(xiǎn)原料。
DENARASE® High Salt酶特性
DENARASE® High Salt是專為在更高、與工藝相關(guān)的鹽濃度下實(shí)現(xiàn)DNA清除活性而設(shè)計(jì)的。該工程酶在0-500 mM一價(jià)陽(yáng)離子濃度范圍內(nèi)具有活性（見(jiàn)圖1）。
圖1. NaCl對(duì)酶活性影響
鎂離子（Mg2+）是確保DENARASE® High Salt發(fā)揮酶活性所必需的輔因子。DENARASE® High Salt在低鎂離子濃度（5-25 mM Mg2+）下具有基本活性，但在高鎂離子濃度（>25 mM Mg2+）下酶活性會(huì)降低。因此，在使用DENARASE® High Salt時(shí)，應(yīng)確保鎂離子濃度在適當(dāng)范圍內(nèi)（見(jiàn)圖2）。
圖2. Mg2+對(duì)酶活性影響
DENARASE® High Salt質(zhì)量參數(shù)
DENARASE® High Salt產(chǎn)品為液體形式，配方為20 mM Tris-HCl（pH 7.4±0.2）、250 mM NaCl、5 mM MgCl2和50%（體積比）甘油。
項(xiàng)目 | 方法 | 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) |
產(chǎn)品性狀 | 直接觀測(cè) | 澄清透明液體 |
酶活性 | 光學(xué)測(cè)定1 | >250 U/µL |
純度 | SDS-PAGE和銀染 | ≥ 99% |
比活性 | 光學(xué)測(cè)定單位蛋白具有的酶活性即280 nm下44,600 L x mol-1 x cm-1的摩爾消光系數(shù) | >5 x 105 U/mg |
內(nèi)毒素 | LAL-Test，參考 Ph. Eur. 2.6.14, 方法C | <0.25 EU/kU |
總菌落數(shù) | TAMC/TYMC 參照 Ph. Eur. 2.6.12 | 需氧菌: < 5 cfu/200 µL 酵母: < 5 cfu/200 µL |
1. Unit定義: 每個(gè)活性單位 (U) 是指在37 °C ，pH 8.0 條件下，在30分鐘內(nèi)將鮭魚精DNA消化至相當(dāng)于ΔA260nm值為1.0 的酸溶性寡聚核苷酸。
DENARASE® High Salt產(chǎn)品參數(shù)
分子量： 27 kDa
最適pH： pH 7.4 - 9.0
最適反應(yīng)溫度：37 °C
等電點(diǎn)(pI)：7.831
輔因子：Mg2+
耐高鹽全能核酸酶DENARASE® High Salt
DENARASE® High Salt訂購(gòu)信息
品名 | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
DENARASE High Salt 25 kU | 22002-25k | 25 kU |
DENARASE High Salt 100 kU | 22002-100k | 100 kU |
DENARASE High Salt 500 kU | 22002-500k | 500 kU |
DENARASE High Salt 1000 kU | 22002-1000k | 1000 kU |
DENARASE High Salt 5000 kU | 22002-5000k | 5000 kU |
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