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 KERRY  Sheff-Vax非動物源復合添加物在疫苗研發和生產中的應用

蛋白水解物因可以提高各種生物制藥生產系統的整體性能而常被用于生產工藝中，比如改善細胞活力、提高細胞增殖和目的蛋白產量、提高病毒培養滴度等等。然而，在一個限定系統中，可能難以同時觀察到這些作用，因為每種細胞培養平臺都是*的，作為培養基添加物的蛋白水解物也是如此。每種水解物對細胞的生長和生產力都具有不同的作用并會受到多種因素的影響，如細胞系、生產水解物的原材料、生產工藝、水解物用量以及基礎培養基的成分等等。

為了滿足市場需求，西美杰代理的KERRY品牌從上世紀以來，充分利用在細胞培養基添加物領域中*進的技術與專業積累，開發出了一系列非動物源復合添加物系統，大大提升了各類細胞系的性能，能有效降低生產成本、簡化篩選工藝，滿足了生物制品領域客戶的生產和監管要求。

KERRY非動物源復合添加物系統優勢特點：

• 功能更加強大——集合了KERRY傳統產品中植物蛋白水解物和成分明確添加物二者在培養效果上的優點；
• 產品線更加合理——根據客戶對下游純化要求的不同，分別開發出了含有生長因子的增強版和對下游純化無影響的無蛋白版本；
• 針對性更強——對于CHO細胞、雜交瘤細胞、禽類細胞、昆蟲細胞以及常用于疫苗生產的各類細胞系都有專門對應的復合添加物產品。

本文中小編將重點為大家介紹常用于疫苗研發和生產的Sheff-Vax系列復合添加物。

1. Sheff-Vax復合添加物介紹

Sheff-Vax復合添加物是一類成分復雜、不含動物源成分（ACF）的培養基添加物系統，根據是否不含蛋白（PF）、添加微量元素（Plus）等各類主要成分的差異，分為以下五個產品（見下表）。Sheff-Vax作為細胞培養基的添加成分，能部分或*替代血清，為多種類型細胞（如BHK、Vero、SF-9、MDCK、MRC5等）提供生長和生產所需的各類營養，包括氨基酸、多肽、碳水化合物、維生素、微量元素等，不僅能顯著提升細胞生長狀態，還能提高病毒產量，因而常常被用于病毒疫苗的研發和生產。Sheff-Vax系列添加物已經在多個上市疫苗生產工藝中被添加和使用，如口蹄疫疫苗、戊肝疫苗、流感疫苗等，也是全球多家細胞培養基生產商的常用原料之一。

*注：ACF - Animal Component Free不含動物源成分；PF - Protein Free不含蛋白質；Plus – 含有微量元素。

2. 如何選擇和使用Sheff-Vax添加物

在實際應用中發現，上述五種Sheff-Vax添加物對不同類型細胞系的適用性表現也有一定差異，我們可以根據下表來選擇和測試合適的Sheff-Vax添加物。對于使用商品化無血清培養基和其他培養基的客戶，Sheff-Vax添加物系統也可以用來優化培養基，提高細胞生產效率和促進細胞增長。這種情況下無需馴化細胞，Sheff-Vax可直接添加到無血清培養基中。Sheff-Vax添加物的高活性和穩定性，使其可以應用于大多數商業培養基。

*注：● 有效；★ *。

Sheff-Vax添加物的配置方法

    使用Sheff-Vax添加物替代血清的培養過程中，需要*進行細胞馴化，逐代降低血清濃度，同時增加Sheff-Vax添加物濃度，進而實現降低或*去除血清和其他動物源成分的培養方案，如下表所示。

*注：對照培養基：基礎培養基+10% FBS； 馴化培養基：基礎培養基+Sheff-Vax添加物。

3. Sheff-Vax添加物應用案例

1）使用Sheff-Vax Plus PF ACF對BHK細胞的降血清馴化案例

BHK細胞降血清培養生長曲線對比

該馴化培養過程添加了Sheff-Vax Plus PF ACF來降低BHK 培養基中FBS的使用量，把FBS濃度從10%降低到0.5%依然可以保持很好的細胞生長狀態。（注：在整個馴化傳代過程中，培養基需要添加0.5%的PluronicF-68來防止細胞凝聚成團。）

2）使用Sheff-Vax ACF對Vero細胞的無血清馴化案例

使用Sheff-Vax添加物可以實現Vero細胞的無血清培養，在逐步減少血清用量直至*去除血清后，Vero細胞生長形態無顯著變化（見下圖）。

Vero細胞生長形態對比

（A）對照組：DMEM+10%胎牛血清；

（B）實驗組：DMEM+0%胎牛血清+2g/L Sheff-Vax ACF+10mg/L rInsulin。

每次傳代逐步減少FBS，同時添加Sheff-Vax ACF，在相同培養時間內，無血清組細胞生長密度可達到10% FBS組細胞密度峰值的一半，延長培養時間還可以獲得更高的細胞密度（見下圖）。

Vero細胞生長曲線對比

(i) 10% FBS, (ii) 7.5% FBS, (iii) 5% FBS,(iv) 2.5% FBS, (v) 1.5% FBS, (vi) 1% FBS, (vii) 0.5% FBS, (viii) 0.25% FBS, (ix) 0.1% FBS, (x) 0% FBS

3）添加Sheff-Vax可以獲得更高的病毒滴度

分別在培養狂犬病毒和麻疹病毒的細胞培養基中添加不同的Sheff-Vax產品，與對照組相比均能有效提升病毒生產滴度。在病毒增殖階段添加Sheff-Vax Plus PF ACF VP對病毒滴度也有顯著的提升（見下圖）。

添加Sheff-Vax培養的病毒滴度對比

綜上所述，Sheff-Vax復合添加物在疫苗研發生產過程中具有非常多的優勢，主要表現為：

Sheff-Vax是一系列非常適用于細胞疫苗生產的非動物源添加物；

Sheff-Vax具有可靠的批間一致性；

Sheff-Vax能發揮出與血清相同的生物學功能；

Sheff-Vax能有效提升病毒疫苗的生產效率；

Sheff-Vax的高性價比能顯著降低生產成本。

 KERRY  Sheff-Vax非動物源復合添加物在疫苗研發和生產中的應用

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