顯微鏡操作
顯微鏡在使用前,應(yīng)先檢查一下它的各個部件是否完整和正常,并進行必要的清潔工作,然后將顯微鏡放置在自己左肩前方的實驗臺上,離桌子邊緣3—6cm為宜,以便觀察。
(一)低倍鏡的使用方法
1.對光用左手轉(zhuǎn)動粗調(diào)螺旋使鏡筒上升或載物臺下降,然后轉(zhuǎn)動物鏡轉(zhuǎn)換器使低倍鏡對準載物臺的通光孔(轉(zhuǎn)動時應(yīng)注意使物鏡上方的缺刻與基座的固定扣相扣合),打開光圈,旋轉(zhuǎn)集光鏡升降螺旋,使集光鏡上端透鏡平面稍低于載物臺平面的高度,兩眼同時睜開,同時調(diào)節(jié)反光鏡方向,直到視野內(nèi)的光線均勻,亮度適中為止。
2.放置玻片標本取一張玻片標本放在載物臺上,有蓋玻片的一面朝上,固定在推進器上,然后用手轉(zhuǎn)動推進器螺旋,把要觀察的標本部位對準通光孔的中心。
3.調(diào)節(jié)焦距用手轉(zhuǎn)動粗調(diào)螺旋,使低倍鏡距玻片標本<6mm(調(diào)節(jié)時必須從側(cè)面注視物鏡與玻片的距離,切勿用眼在目鏡上觀察的同時就轉(zhuǎn)動粗調(diào)螺旋,以防鏡頭碰撞玻片造成損壞>,然后兩眼同時睜開,用手慢慢轉(zhuǎn)動粗調(diào)螺旋,使鏡頭上升或使載物臺下降,當視野中出觀物像時,再調(diào)節(jié)細調(diào)螺旋,直至視野中出現(xiàn)清晰的物像為止。如果物像不在視野中心,可上下左右移動玻片標本位置(注意:破片移動方向與觀察物像移動的方向相反)。如果在調(diào)節(jié)焦距時,鏡頭和標本片的距離已超過工作距離而未見到物像,則應(yīng)嚴格按上述步驟重新操作。
(二)高倍鏡的使用方法
1.一定要先和低倍鏡下找到要觀察的標本物像后,再把需要放大的部分移至視野正中,并把物像調(diào)節(jié)到最清晰的程度。
2.轉(zhuǎn)動物鏡轉(zhuǎn)換器直接轉(zhuǎn)換高倍物鏡即可見到視野中有不太清晰的物像,此時只要再慢慢向上或向下轉(zhuǎn)動細調(diào)螺旋,即可得到清晰的物像。如果發(fā)生高倍鏡頭碰到玻片不能轉(zhuǎn)換時,應(yīng)檢查原因(如低估鏡的焦距是否調(diào)好,標本片有否放反或物鏡是否松動等),再重新操作。
(三)油鏡的使用方法
1.在高倍鏡下找到所要觀察的標本后將需要進一步放大的部分移至視野中心。
2.把集光器上升到zui高位置,光闌開到zui大。
3.轉(zhuǎn)動物鏡轉(zhuǎn)換器。移開高倍鏡,在要觀察的部位的蓋玻片上滴加一滴香柏油作為介質(zhì)(因香柏油的折射率和玻璃的折射率大致相問)。
4.稍稍上升鏡筒或下降載物臺,轉(zhuǎn)動物鏡轉(zhuǎn)換器使油鏡對準通光孔,然后從側(cè)面觀察油鏡與標本之間的距離,慢慢轉(zhuǎn)動粗調(diào)螺旋,使油鏡與油滴接觸,再小心地使它貼近蓋玻片表面。這步操作要特別注意,調(diào)節(jié)時速度不要過快。一般顯微鏡也可不上升鏡簡直接轉(zhuǎn)換上鏡油,油鏡即可浸在油滴中。
5.用眼觀察目鏡,同時小心地轉(zhuǎn)動細調(diào)螺旋使鏡頭微微上升或下降載物臺,直到出現(xiàn)清晰的物像。如果是直接轉(zhuǎn)換油鏡.則只要轉(zhuǎn)動細調(diào)螺旋,稍微下降鏡頭或上升載物臺,即能清楚觀察到物像。切忌使用粗調(diào)螺旋,或在視野中看不到模糊的像時,一直單方向轉(zhuǎn)動細調(diào)燎旋使鏡頭下降,這樣會壓碎玻片標本或損壞鏡頭。
6.油鏡使用完畢,必須把鏡頭和玻片標本上的香柏油擦凈。先用拭鏡紙蘸少許二甲苯將鏡頭上的大部分油去掉,再用干拭鏡紙擦拭。擦拭時要順鏡頭的直徑方向,不要沿鏡頭的圓周擦。
三、使用顯微鏡的注意事項
1.拿顯微鏡時,要一手緊握鏡臂,一手托住鏡座,不要單手提拿,以防目鏡或其他零件滑落。
2.顯微鏡不可放置在實驗臺邊緣,以免碰翻落地。
3.不要隨意取下目鏡或拆卸顯微鏡的各種部件,以防灰塵落入內(nèi)部或發(fā)生丟失損壞等意外事故。
4.使用顯微鏡時,操作要正規(guī),養(yǎng)成兩眼同睜、兩手并用的習(xí)慣,邊觀察邊計數(shù)和繪圖等。
5.要保持顯微鏡的清潔,發(fā)現(xiàn)有灰塵或操作中不慎使鏡頭和載物臺沾上染料、水滴等,應(yīng)及時擦去。光學(xué)和照明部分的鏡面只能用擦鏡紙輕輕擦拭,切勿用手指、手帕和綢布等擦摸,以免磨損鏡面。機械部分可以用布擦拭。
6.顯微鏡使用完畢,轉(zhuǎn)動粗調(diào)螺旋上升鏡筒或下降載物臺,取下標本片,轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器使物鏡離開通光孔,然后再下降鏡筒或上升載物臺使接近物鏡,垂直反光鏡,下降集光器。關(guān)閉虹彩光闌,復(fù)原傾斜關(guān)節(jié)和報片器位里,zui后填寫使用登記,把顯微鏡放回鏡箱。
普通光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)及其使用
光學(xué)顯微鏡的主要構(gòu)造
光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造主要分為三部分:機械部分、照明部分和光學(xué)部分
(一)機械部分
1.鏡座是整個顯微鏡的基座。通常為馬蹄形或長方形,用以支持整個鏡體的平穩(wěn)。有的顯微鏡在鏡座內(nèi)裝有照明裝置。
2.鏡柱是鏡座上方直立的部分,用以連接和支持鏡臂。
3.鏡臂是鏡柱向上的彎曲部分,取用顯微鏡時握持的有的顯微鏡在鏡臂與鏡住之間有一活動關(guān)節(jié),稱為傾斜關(guān)節(jié)??墒圭R簡向后傾斜,使于觀察。
4.鏡筒連在鏡臂前方的圓筒,一般簡長為160mm。有的鏡筒是固定不動的,有的可上下移動,在鏡筒上端裝有目鏡,下端連接物鏡轉(zhuǎn)換器。
5.調(diào)節(jié)器是裝在鏡臂或鏡柱上的大小兩種螺旋,轉(zhuǎn)動時可使鏡筒或載物臺上下移動,以調(diào)節(jié)物鏡和標本之間的距離,即調(diào)節(jié)焦距。粗調(diào)螺旋轉(zhuǎn)動時上下移動范圍較大,能迅速調(diào)節(jié)物鏡與標本的距離使物像呈現(xiàn)于視野中.細調(diào)螺旋轉(zhuǎn)動時升降幅度小.一般在用粗調(diào)螺旋調(diào)焦的基礎(chǔ)上或在使用高倍鏡時,用它作比較的調(diào)節(jié),從而得到*清晰的物像,并能觀察標本不同層次和不同深度的結(jié)構(gòu)。
6.物鏡轉(zhuǎn)換器(旋轉(zhuǎn)盤)接在鏡筒下端可自由旋轉(zhuǎn)的圓盤,具有3—4個圓孔,物鏡即裝在這些圓孔里,轉(zhuǎn)動旋轉(zhuǎn)盤可調(diào)換不同放大倍率的物鏡。當物鏡轉(zhuǎn)到工作位置時(即與光軸合軸),一定要將旋轉(zhuǎn)盤邊緣的缺刻和基座上的固定扣相扣合,否則無法觀察標本。
7.載物臺在鏡筒下方的方形或圓形平臺,用以放置玻片標本。平臺*有一圓形的通光孔,來自下方的光線經(jīng)此孔照射到標本上。載物臺上裝有標本片推進器,其左側(cè)彎形的彈簧夾是用來固定標本片的,轉(zhuǎn)動右側(cè)兩個螺旋能向前后左右移動標本。有的推進器上還有刻度,可以計算標本移動的距離和確定標本的位置。
(二)照明部分
在載物臺下方裝有一套照明裝置,由聚光器、虹彩光聞和反光鏡三者組成:1.反光鏡是一個一面平另一面凹的雙面鏡,裝在鏡座基部,可向任意方向轉(zhuǎn)動。其作用是改變光源的方向反射到集光鏡上,再經(jīng)通光孔照明標本。反光鏡的凹面聚光力強,適于光線較弱時使用,在光線較強時,宜用平面鏡。
2.集光器又稱聚光器,位于載物臺下方的支架上,由集光鏡和虹彩光圈組成。利用鏡臺下方的調(diào)節(jié)螺旋可控制其升降,以調(diào)節(jié)光線的強弱。
(1)集光鏡一船由兩個或三個透鏡構(gòu)成,其作用相當于一個凸透鏡,具有會集光線成束以增強照明度的功能。
(2)虹彩光圈位于集光鏡下方,也叫光圈,有十幾張金屬薄片組成。其外側(cè)伸出一柄。推動此柄可改變光闌孔徑的大小,以調(diào)節(jié)通光量。有些顯微鏡的虹彩光闌下還裝有濾光玻片支持框,可安放不同顏色的濾光玻片。
(三)光學(xué)部分
1.目鏡又稱接目鏡,裝在鏡筒的上端,通常由兩個透鏡組成。在上下透鏡之間或在下透鏡的下面裝有一個用金屬制成的光闌,由它決定視野的大小,故稱現(xiàn)場光闌。在光闌的面上還可安裝目鏡測微尺和用人發(fā)粘貼在光闌上作為指針,用以指示觀察目標。一架顯微鏡常備有2—3個目鏡,上面刻有5x、10x、15×等符號以示其放大倍數(shù),可選擇使用,一般常用的目鏡倍數(shù)為10x。
2.物鏡又稱接物鏡,裝在物鏡轉(zhuǎn)換器上,一般有3—4個。物鏡是由數(shù)片凸透鏡和凹透鏡嚴格組合起來的一組鏡片,它是顯微鏡分辨性能高低的關(guān)鍵部件。通常在物鏡上標有主要性能指標——放大倍數(shù)和鏡口率(如10/o.25、40/o.65和100/1.25),鏡筒長度和所要求的蓋玻片厚度(如160/0.17)。根據(jù)放大倍數(shù)不同,習(xí)慣上把10倍以下的叫低倍鏡,把40倍的叫高倍鏡,把90或100倍的油浸物鏡叫油鏡。為便于區(qū)別,在高倍鏡和油鏡上常用一圈不同顏色的線作為特殊標志。
鏡口率(數(shù)值孔徑numerialaperture,簡寫為N.A)可以反映該物鏡分辨力的大小,數(shù)字愈大,表示分辨力愈高。
工作距離是指顯微鏡處于工作狀態(tài)(物像調(diào)節(jié)清晰)時,物鏡zui下面透鏡的表面與蓋玻片上表面之間的距離。物鏡的放大倍數(shù)愈大,工作距離愈小表1—I。