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伏馬毒素的危害及檢測方法
伏馬菌素的信息:
伏馬菌素 (Fumonisin FB) 是一種霉菌毒素,是由串珠鐮刀菌 (Fusarium moniliforme Sheld)產(chǎn)生的水溶性代謝產(chǎn)物,是一類由不同的多氫醇和丙三羧酸組成的結(jié)構(gòu)類似的雙酯化合物。此后又從伏馬毒素中分離出伏馬毒素B1(FB1)和伏馬毒素B2(FB2)。到目前為止,發(fā)現(xiàn)的伏馬毒素有FA1、FA2、FB1、FB2、FB3、FB4、FC1、FC2、FC3、FC4和FP1共11種,分為4類即FA、FB、FC和FP,但主要分布以FB1、FB2和FB形式存在,其中FB1占總量的70%,毒性強,主要污染玉米及其制品。
伏馬毒素的危害:
1、伏馬毒素在糧食作物中的危害
伏馬毒素在自然界廣泛存在,主要由串珠鐮刀菌(Fusarium verticillioides)、層出鐮刀菌(Fusarium proliferatum )和Fusarium nygamai等鐮刀菌屬產(chǎn)生 。目前至少有18種伏馬毒素已被分離鑒定,根據(jù)它們的化學(xué)結(jié)構(gòu)分為A族、B族、C族和P族。伏馬毒素B族,主要是FB1和FB2在自然界的存在最為廣泛,主要污染玉米及其制品。玉米中伏馬毒素污染程度與種植地理位置、農(nóng)業(yè)規(guī)范以及玉米品種有關(guān)。在氣候溫暖的玉米產(chǎn)區(qū),常常發(fā)現(xiàn)高水平污染的伏馬毒素。伏馬毒素的污染水平也受收獲前和收獲期間的環(huán)境因素如溫度、濕度、干旱和降雨等影響。收獲后玉米的不當(dāng)儲藏也會導(dǎo)致伏馬毒素污染水平增加。
2、伏馬毒素對人和畜噙的危害
FB1可引起馬腦白質(zhì)軟化癥、豬肺水腫綜合征和大鼠肝癌等動物疾病,對動物養(yǎng)殖業(yè)影響較大。國際癌癥研究機構(gòu)(IARC)將FB1列為對人類可能的致癌物質(zhì),動物實驗表明:肝和腎是FB1的主要作用靶向?qū)ο螅瑑纱卧u價結(jié)果給出伏馬毒素B1、B2、B3單獨或聯(lián)合的暫定每日最大耐受攝入量(PMTDI)為2ug/kg bw/day;人類流行病學(xué)研究表明,世界各個地區(qū)玉米感染串珠鐮刀菌(伏馬毒素的主要產(chǎn)生菌)和食道癌發(fā)病的發(fā)生之間具有關(guān)聯(lián),然而,目前尚沒有建立明確的劑量反應(yīng)關(guān)系,其毒理機制也不清楚。此外,人口統(tǒng)計、種族、遺傳易感性、文化,經(jīng)濟和營養(yǎng)狀況等地域差異也會影響食道癌發(fā)病率。
伏馬毒素在國際上和國內(nèi)標(biāo)準(zhǔn):
伏馬毒素在世界范圍的廣泛存在,尤其對玉米影響最大。為了控制玉米中伏馬毒素的危害,一些發(fā)達(dá)國家和地區(qū)按照玉米形態(tài)和加工用途分類規(guī)定了伏馬毒素標(biāo)準(zhǔn)
1、歐盟規(guī)定:
伏馬毒素(FB1+FB2)在未加工的玉米(不包括用于濕磨法處理的未加工玉米)中為4000μg/kg;供人直接食用的玉米和玉米制品為1000μg/kg;供嬰幼兒食用的玉米食品和嬰兒食品為200μg/kg
2、美國規(guī)定:
伏馬毒素(FB1+FB2+FB3)在脫胚的干磨玉米制品(脂肪含量< 2.25%,干基重)中為2000μg/kg;脫胚的干磨玉米制品(脂肪含量≥2.25%,干基重)以及干磨玉米麩皮和用于生產(chǎn)粗玉米粉凈玉米的為4000μg/kg。
3、國際食品法典委員會(CAC)規(guī)定:
未加工的玉米為4000μg/kg,玉米粉和玉米面中為2000μg/kg ,同時制訂了相關(guān)采樣計劃規(guī)范。
4、我國對伏馬毒素的規(guī)定:
我國現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中真菌毒素限》(GB2761-2017)尚未涉及伏馬菌素指標(biāo)的限參照CAC及歐美發(fā)達(dá)國家標(biāo)準(zhǔn)情況,擬將我國玉米原糧中伏馬菌素限規(guī)定為4000μg/kg,玉米面(渣)中伏馬菌素限規(guī)定為2000μg/kg,含有玉米的谷物制品中伏馬菌素限規(guī)定為1000μg/kg,含有玉米的嬰幼兒谷類輔助食品中伏馬菌素限規(guī)定為200μg/kg。
我國最新GB 13078—2017《飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定了部分飼料原料和飼料產(chǎn)品中的FB1和FB2總量的標(biāo)準(zhǔn)。其中飼料原料玉米及其加工產(chǎn)品、玉米酒糟類產(chǎn)品、玉米青貯飼料和玉米秸稈中伏馬毒素的限為 60 mg/kg,其他飼料產(chǎn)品中伏馬毒素的量在5~20 mg/kg[23]。
伏馬毒素檢測標(biāo)準(zhǔn)部分索引:
1、CAC/RCP 51-2003預(yù)防谷物中霉菌毒素污染操作規(guī)范,包括赭曲霉素A、玉米赤霉烯酮、伏馬毒素、單端孢霉烯族毒素的附錄
2、DB37/T 3856-2019飼料中黃曲霉毒素B1、嘔吐毒素、伏馬毒素B1和玉米赤霉烯酮的測定 高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法
3、GB 5009.240-2016食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中伏馬毒素的測定
4、LS/T 6130-2017糧油檢驗 糧食中伏馬毒素B1、B2的測定 超高效液相色譜法
5、LS/T 6133-2018糧油檢驗 主要谷物中16種真菌毒素的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法
6、NY/T 1970-2010飼料中伏馬毒素的測定
7、SN/T 3136-2012出口花生、谷類及其制品中黃曲霉毒素、赭曲霉毒素、伏馬毒素B1、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇、T-2毒素、HT-2毒素的測定
8、SPGG 國家食品藥品監(jiān)督管理局食藥監(jiān)食監(jiān)三便函(2014)73號附件-2014食品中伏馬毒素的測定高效液相色譜—質(zhì)譜法
常用伏馬毒素檢測方法對比:
1、伏馬毒素膠體金快速檢測法:基于將膠體金作為示蹤標(biāo)志物用于抗原抗體的免疫反應(yīng),待檢物質(zhì)加樣至試劑卡后,在層析作用下,待檢物質(zhì)中的抗原與金標(biāo)試劑的結(jié)合物發(fā)生特異性結(jié)合而被截留,聚集于檢測帶并產(chǎn)生顏色,配合讀數(shù)儀和內(nèi)置標(biāo)準(zhǔn)曲線,確定待測物質(zhì)含量。是嘔吐毒素簡便的檢測方,樣品處理簡單,五到十分鐘就可以看到檢測結(jié)果。可以根據(jù)G、T線,初步確定所測樣本嘔吐毒素含量范圍。可作為粗略判斷方法,廣泛用于樣本初步篩查,也是目前主流的檢測方式之一。
2、酶聯(lián)免疫吸附測定法:依據(jù)該方法開發(fā)出來的嘔吐毒素檢測試劑盒,可以定量的檢測樣品中嘔吐毒素的含量,目前進(jìn)口及國產(chǎn)試劑盒均有大量品牌,價格適中,有國標(biāo)支持,但操作比較復(fù)雜,步驟較多,對人員的操作熟練程度及環(huán)境要求較高,適合有良好質(zhì)檢實驗室的企業(yè)使用,可作為產(chǎn)品的初步質(zhì)量控制。
3、免疫親和層析柱檢測法:伏馬毒素檢測免析親和柱方案基于抗原抗體特異性可逆結(jié)合特性技術(shù),根據(jù)抗原抗體的高特異性,從復(fù)雜的待測樣品中提取目標(biāo)化合物,再結(jié)合液相色譜法及液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用檢測技術(shù)進(jìn)行定量檢測。該項技術(shù)靈敏度高,測定范圍廣泛,采用單克隆免疫技術(shù),可以有效性地將嘔吐毒素和其他真菌毒素分離出來,分離效率和回收率高,正確性和可靠性強,有國標(biāo)支持。但檢測成本高,儀器維護(hù)成本高。一般作為檢測機構(gòu)終端判定方法,也有大型企業(yè)作為產(chǎn)品質(zhì)量衛(wèi)生指標(biāo)控制方法。
4、熒光定量檢測卡法:伏馬毒素?zé)晒舛繖z測技術(shù)基于免疫層析和特異性免疫反應(yīng),針對檢測項目遴選高特異性的單克隆抗體,依托先進(jìn)的熒光量子點微球標(biāo)記技術(shù),在層析作用完成特異性結(jié)合,并激發(fā)熒光強度,通過專用的熒光設(shè)備測量檢測線和質(zhì)控線的熒光強度值,結(jié)合內(nèi)置的標(biāo)準(zhǔn)曲線完成檢測過程。可以和親和柱方法相媲美,檢測價格適中,有行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)支持,既適合實驗室檢驗使用,也能隨車攜帶,收糧現(xiàn)場使用。相較于傳統(tǒng)的膠體金檢測技術(shù)具備靈敏度高、數(shù)字穩(wěn)定等優(yōu)勢是目前主流的檢測方式
以上幾種方法各有優(yōu)缺點,理化方法最大的優(yōu)點是結(jié)果準(zhǔn)確、法定認(rèn)可,但此方法需要大型的儀器設(shè)備,設(shè)備價格昂貴,操作過程復(fù)雜、時間較長,并且沒有辦法在現(xiàn)場和基礎(chǔ)小型實驗室使用,所以不太適用于大規(guī)模樣本的篩查和日常的內(nèi)控檢測。膠體金快速檢測卡是企業(yè)常用的快速檢測方法,此類方法用于大量樣品的篩查,具有操作簡便,檢測快速,成本較低等優(yōu)點。酶聯(lián)免疫吸附測定法,但操作比較復(fù)雜,步驟較多,對人員的操作熟練程度及環(huán)境要求較高,適合有良好質(zhì)檢實驗室的企業(yè)使用
綜上所述,很多食品飼料加工企業(yè)一般都是用伏馬毒素?zé)晒舛靠焖贆z測法,結(jié)果快速準(zhǔn)確、靈敏度高,數(shù)字穩(wěn)定的優(yōu)勢。是目前主流的檢測方式
深圳后王真菌毒素?zé)晒舛繖z測儀一體機開箱即檢,所需設(shè)備、試劑、耗材一站式提供,開箱即檢;定量結(jié)果檢測只需幾分鐘,結(jié)果精確穩(wěn)定,平均回收率可達(dá)90%以上。HW-JBZJ真菌毒素檢測儀廣泛應(yīng)用于糧油監(jiān)測中心、糧油飼料生產(chǎn)加 工、食品加工貿(mào)易、面粉廠、糧食局、畜禽養(yǎng)殖戶自查、工商質(zhì)監(jiān)部門用于市場快速篩查等。