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微生物實驗室質量控制要素

2016-4-15　　閱讀(1467)

一、質量控制相關定義（1）質量控制：滿足質量要求的操作技術和活動。（2）質量保證：為了滿足實驗室質量要求，制定相應的計劃，實施證明（記錄）所進行的一系列的系統活動。（3）外部質量控制：通過互相校準和/或檢驗對實驗室的操作和結果所進行的控制。（4）內部質量控制：實驗室內部采取的以對比分析、跟蹤以及相關方法，對實驗室工作的連續性控制計劃。（5）質量手冊：是描述質量系統元素的文件或文件的集合。二、實驗室要求按國家實驗室認可的概念，是指一個能夠承擔法律責任的實體。這里所指的是實驗室（微檢室）內建立的質量管理的保證體系。人員、房屋、設備滿足檢測工作需要。 1、人員要求實驗室人員的分類：管理人員、技術人員、人員等。相應崗位的人員，應具備相應的技術能力，相應的技術能力證明（證書及證件）。微生物檢驗室因有相應技術能力的人負責室內的技術工作，并設立質量監督員。 2、房屋條件要求房屋要求：具有適宜、足夠寬敞、通風有良好的照明。房屋內墻面及地等應采用易于清潔的材料，保持房間清潔。房間的設置，以其開展的工作內容加以分用，設立房間。房間的大小還應根據從事實驗人員的進入數量上加以考慮。 3、環境設施要求房間的溫濕度控制與記錄（樣品存放室）。特殊環境的微生物指標控制與記錄（無菌室等）。工作室的標準操作規程和定期的檢測校準程序（潔凈室等）。特殊環境中的設施質量控制應符合有關要求（凈化工作臺）。三、設備控制和程序微生物檢驗常用需監控的設備和儀器： 1）培養箱（生化培養箱或CO2培養箱等）、干燥箱、高壓滅菌鍋、凈化工作臺、pH計、冰箱，（低溫冰箱或冷柜）溫度計、紫外燈、顯微鏡、離心機、天平。 2）小計量容器。 3）微生物測定儀器、微生物檢定儀器、空氣采樣器、酶標儀等。 1、高壓滅菌鍋的溫度控制高壓滅菌鍋；生物指示菌法（常用）、化學變色紙片及高壓滅菌鍋溫度計等方法進行檢測。生物指示菌法是一種高壓滅菌鍋的效果顯示法。高壓滅菌鍋由專人按作業指導書操作，并做好每一次的作業記錄。高壓滅菌鍋使用時，內置物品不能太多，單位體積內的內容物（每瓶內的培養基）不能太多。同時應注意內容物不同耐受溫度。總的暴露時間不要超過45min。高壓滅菌鍋日常工作記錄應包含以下信息：高壓滅菌的材料、開始時間、壓力/溫度、取出時間、高壓滅菌膠帶的顏色變化（日常常用無菌培養代替）。高壓滅菌鍋溫度波動范圍：110，115和121±2℃。高壓滅菌鍋校準周期一般在半年。 2、培養基配制用蒸餾水的控制對于蒸餾水器來說：按設備說明，定期清潔離子交換器和更換離子交換材料。檢測要求：西歐標準為微生物檢驗用蒸餾水的特定電導率＜0.5ms/m；細菌數＜50cfu/ml。我們日常用的標準為＜10ms/m，未見有細菌指標。檢測頻率：1次/每月。蒸餾水定點供應，并做好相應的質量控制，記錄檢測結果。 3、天平的管理天平放置要求：無振動、無氣流影響及水平臺面上。天平要有使用及運行檢查記錄。天平作為計量儀器是列入國家強制檢定的范圍，一般1次/年進行檢定。運行檢查頻率按運行計劃或按產品（天平生產廠家）給出的標準重量單位進行對照。 4、pH計 pH計使用前應用標準液進行校準。緩沖液使用有效期： PH4.00 約1年 PH7.00 約6個月 pH9.00 約6個月 pH計的維護：電極外表的定期清洗；電極敏感性檢測及極性恢復。 5、超凈工作臺的控制水平流凈化工作臺工作區域，要求潔凈度為100級。空氣沉降30min，細菌數＜1個/皿。垂直流凈化工作臺，細菌數＜0.49個/皿。超凈工作臺運行檢查頻次：1次/月主要是細菌沉降檢測。凈化工作臺過濾膜一般為一年更換一次，并同時進行粒子與細菌沉降檢測。 6、紫外線燈的控制檢測方法：儀器測試法和生物測試法。前者是通過儀器檢測紫外燈管發射的紫外光強度。國家消毒技術規范中表明在距離照射無1米處，要求其強度為90。生物測試法：采用一定的菌培養物，經一定比例稀釋，菌量控制在200-250個/0.5ml，涂布平板在紫外燈光下照射，2min，同時設置普通光源的對照組，后置37℃48h，計算其殺滅率。要求殺滅率達99%。 7、顯微鏡的控制顯微鏡應制定作業指導書，日常維護記錄及自校記錄。顯微鏡應置于無振動，避免灰塵，防潮等要求的環境。 8、其它微生物檢測儀器的控制細菌鑒定儀、酶標儀等設備，工作中常用陽性對照檢測其功能正常性。儀器的檢定則按有關的部門檢定或按自校作業指導書進行。儀器的使用登記、校準計劃、校準記錄等文件存檔。儀器專人使用、操作者應取得相應的崗位培訓合格，持證上崗。四、檢測質量保證定期使用有證標準物質和次級標準物質（參考物質）進行內部質量控制。實驗室間的比對或能力驗證，利用相同或不同方法進行重復檢測，對留存的樣品進行在檢測。

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