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安捷倫XDB-C18液相色譜柱

產(chǎn)品介紹

安捷倫 ZORBAX Eclipse XDB色譜柱 C18、C8、苯基和CN是為在寬pH范圍(pH2-9)獲得堿性、酸性和中性化合物良好的峰形而設(shè)計(jì)的。這一寬pH范圍實(shí)現(xiàn)了使用一個(gè)系列的色譜柱進(jìn)行方法開(kāi)發(fā)的靈活性。Eclipse XDB色譜柱可以用于低pH(2-3)的初始方法開(kāi)發(fā)，且可提供所有類型化合物的高分離度和出色峰形。同樣的色譜柱還可用于中等pH(6-8)范圍的方法開(kāi)發(fā)。在中等pH范圍，殘留硅羥基活性更大，造成峰拖尾的相互作用更容易發(fā)生。為了克服這些相互作用，Eclipse XDB采用的工藝進(jìn)行超密鍵合和雙封端，以覆蓋盡可能多的硅羥基。結(jié)果得到了pH 2-9范圍內(nèi)堿性化合物的出色峰形。Eclipse XDB色譜柱有C18、C8、苯基和CN鍵合相用于大多數(shù)分離的選擇性優(yōu)化，還有StableBond，Bonus-RP和Extend-C18可提供更多的選擇性。

品牌 安捷倫 型號(hào) Agilent XDB-C18 4.6×250mm 5μm

測(cè)量范圍 見(jiàn)資料 測(cè)量對(duì)象 見(jiàn)資料

控溫范圍 25（℃） 尺寸 150（mm）

重量 0.2（kg）

適用PH范圍2-9
對(duì)堿性、中性和酸性化合物在中等PH范圍內(nèi)有出色峰形
超密鍵合和雙封端技術(shù)延長(zhǎng)了柱子在中性PH條件下的壽命
穩(wěn)定性提高
用3.5μm柱可實(shí)現(xiàn)快速分離

液質(zhì)聯(lián)用儀使用經(jīng)驗(yàn)

一、做液質(zhì)，加離子誘導(dǎo)劑得是揮發(fā)性的，生物堿用甲酸或乙酸  

二、我認(rèn)為要維護(hù)好儀器  首先流速不能過(guò)大，液質(zhì)是不能承載過(guò)大流速的；  其次電壓不要加到極限，尤其是正負(fù)離子轉(zhuǎn)換時(shí)要適當(dāng)調(diào)整； zui后是做完樣一定要及時(shí)沖洗和吹掃管路。  

三、LC和MS的條件優(yōu)化是成功的關(guān)鍵。

四、  1、由于液質(zhì)的流速較小（ESI一般為0.2ml/min），所以配置樣品的溶劑強(qiáng)度不能太大，盡量小于起始比例，否則，會(huì)出現(xiàn)保留時(shí)間偏移等問(wèn)題。   2、如果在液相上摸好的條件，注意尤其是流動(dòng)相的組成要轉(zhuǎn)化成合適LCMS分析的。   3、磷酸鹽及其他不揮發(fā)緩沖鹽在離子源會(huì)沉淀并堵塞毛細(xì)管等，要更換成可揮發(fā)的有機(jī)緩沖鹽。   4、緩沖鹽會(huì)導(dǎo)致離子抑制，因此要控制緩沖液的強(qiáng)度，<10mM。   5、去污劑、表面活性劑會(huì)有離子抑制現(xiàn)象發(fā)生， 表面活性劑產(chǎn)生的加合物和離子簇會(huì)干擾質(zhì)譜數(shù)據(jù)，因此作液質(zhì)聯(lián)用儀時(shí)，不要使用洗滌劑清洗玻璃器皿等容器，如果一定要用，建議超聲清洗多次。

五、   要做好質(zhì)譜的維護(hù)工作，就得從小處著手。比如分析的樣品必須要干凈，這樣既可以保護(hù)色譜柱，也可以防止污染質(zhì)譜；分析了大量的生物樣品后，沖洗系統(tǒng)時(shí)，先用高比例的水相沖洗，把源也給洗一下，然后再換用高比例的有機(jī)相，這時(shí)要把柱后管路從源上拿下來(lái)，避免柱中的雜質(zhì)給沖進(jìn)質(zhì)譜……細(xì)節(jié)很多很多，大家在日常應(yīng)用中盡量注意和避免就可以了。  

六、  做液質(zhì)三年了，島津、waters、ABI和finigan的都摸過(guò)，經(jīng)驗(yàn)談不上，說(shuō)點(diǎn)自己的注意點(diǎn)吧。   1.前處理：樣品一定要干凈，不管是為了質(zhì)譜還是為了保護(hù)柱子，生物樣品提取的好些，如果直接沉淀，一定要注意，盡量高轉(zhuǎn)速12000rpm以上，低溫離心，離2次（保險(xiǎn)一點(diǎn)），轉(zhuǎn)移樣品也要仔細(xì)，從中間慢慢吸，有時(shí)會(huì)有漂浮物，島津的質(zhì)譜好像做直接沉淀的源比較容易堵，Waters的好些。   2.樣品濃度：質(zhì)譜是靈敏度很高的儀器，進(jìn)樣濃度一定不能太高，1－2ug/ml已經(jīng)可以啦，太高的濃度對(duì)儀器來(lái)說(shuō)比較容易造成殘留，而且定量也會(huì)不準(zhǔn)啦。   3.流動(dòng)相：流動(dòng)相中盡量加易揮發(fā)的鹽，盡量不要加表面活性劑之類的，容易離子抑制，如果遇到離子抑制，可以試試把你的樣品峰往后推推或者改變提取方法，也可以試試用APCI源。如果你的液相是低壓混合的，盡量不要跑梯度，那樣很費(fèi)時(shí)間，如果沒(méi)辦法，一針又要走很長(zhǎng)時(shí)間的話，可以考慮切換，只測(cè)樣品出峰前后的那段時(shí)間，這樣可以保護(hù)質(zhì)譜。但是如果你用粗柱子，較高流速的也可以考慮跑梯度，如API4000，但要盡量減小死體積。   4.沖洗：沖柱子自然不用說(shuō)了，低有機(jī)相和高有機(jī)相分別沖一定時(shí)間（各至少半個(gè)小時(shí)以上吧），柱子保存在高有機(jī)相中。做完試驗(yàn)，沖源也是很重要的，也是低有機(jī)相和高有機(jī)相沖，但是時(shí)間可以不用那么長(zhǎng)，你可以先沖源再?zèng)_柱子，或者兩者分開(kāi)沖，個(gè)人覺(jué)得分開(kāi)沖好些，這樣柱子上的臟東西就不會(huì)進(jìn)到源里面去啦。

沖源的時(shí)候氣可以關(guān)小些。  

七、  1、樣品必須過(guò)0.22um濾膜過(guò)濾，不得有顆粒物；  2、上樣的溶劑，必須是色譜純，和你的流動(dòng)相比例一致； 3、反相體系，不允許用正己烷之類極性弱的溶劑溶解樣品并上樣。 4、水，自然是純凈水了；  5、樣品不允許含有金屬離子、表面活性劑（不要用洗潔精洗瓶子）、磷酸鹽、硼酸鹽等不揮發(fā)鹽； 6、淋洗液緩沖溶劑必須用可揮發(fā)的，如乙酸、乙酸銨、氫氧化四丁基銨等，色譜純級(jí)別。 7、樣品pH5~7嚴(yán)禁含有無(wú)機(jī)或有機(jī)強(qiáng)酸強(qiáng)堿。  8、六通閥處變?nèi)ǎ褯](méi)有信號(hào)的區(qū)域，切換到廢液，這樣減少源的污染 9、定期振氣、清洗離子源，換油。