美谷分子儀器(上海)有限公司
使用雙發(fā)射熒光染料監(jiān)測癌細(xì)胞系的線粒體膜電位
檢測樣品:癌細(xì)胞系
檢測項目:線粒體膜電位
方案概述:從研究疾病到評估藥物和環(huán)境化合物誘導(dǎo)的毒性反應(yīng),基于細(xì)胞的測定法通常聚焦于線粒體,旨在監(jiān)測細(xì)胞健康。線粒體功能是整個細(xì)胞健康的關(guān)鍵指標(biāo),線粒體功能障礙與多種疾病(包括帕金森氏病,阿爾茨海默氏病,心力衰竭,局部缺血性疾病和癌癥)的關(guān)聯(lián)密切相關(guān)。
從研究疾病到評估藥物和環(huán)境化合物誘導(dǎo)的毒性反應(yīng),基于細(xì)胞的測定法通常聚焦于線粒體,旨在監(jiān)測細(xì)胞健康。線粒體功能是整個細(xì)胞健康的關(guān)鍵指標(biāo),線粒體功能障礙與多種疾病 ( 包括帕金森氏病,阿爾茨海默氏病,心力衰竭,局部缺血性疾病和癌癥 ) 的關(guān)聯(lián)密切相關(guān)。 1 此外,罕見疾病的發(fā)病機制可能由編碼線粒體蛋白的基因或線粒體 DNA 中的突變驅(qū)動。 1 在整個藥物開發(fā)和測試過程中,評估線粒體功能是至關(guān)重要的。恢復(fù)線粒體功能的療法的發(fā)展和靶向癌癥線粒體功能障礙的化療藥物的發(fā)展就是例證。 3 此外,線粒體功能的評估是臨床前藥物安全性評估中至關(guān)重要的一步,因為線粒體功能障礙可能由藥物觸發(fā),進而對細(xì)胞和組織健康產(chǎn)生不利影響。測量線粒體膜電位 (MMP) 以監(jiān)測線粒體代謝活性的變化是一種評估線粒體功能的靈敏且有效的方法。線粒體膜電位是檢測凋亡過程中線粒體去極化,檢測多藥耐藥細(xì)胞以及評估各種毒性篩選中線粒體功能的重要工具。 1-2 MMP 的評估通常使用親脂性陽離子熒光染料進行。 根據(jù)線粒體膜電位的狀態(tài),MITO-ID膜電位染料的熒光會發(fā)生變化。具體來說,細(xì)胞質(zhì)中它以單體形成存 在,發(fā)出綠 色熒 光 (FITC, 530 nM);在活性線粒體中,它在線粒體基質(zhì)中聚集而發(fā)出橙色熒光 (TRITC,570 nM)。當(dāng) MMP 被破壞時,MITO-ID 染料退出去極化線粒體,而以單體形式存在,可以觀測到橙色熒光降低到消失。
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