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多參數 THP-1 細胞分化及細胞因子分泌表型分析試驗評價抗炎化合物
檢測樣品:細胞
檢測項目:抗炎化合物
方案概述:巨噬細胞起源于血液中的單核細胞,這些單核細胞離開血液循環,分化成不同的組織。巨噬細胞參與細菌和受損細胞的檢測和吞噬。此外,巨噬細胞通過釋放細胞因子引發炎癥,細胞因子激活血管細胞,促進細胞因子粘附血管并遷移到組織中。分化的THP-1細胞已被廣泛用于體外巨噬細胞模型研究巨噬細胞參與炎癥反應。
巨噬細胞起源于血液中的單核細胞,這些單核細胞離開血液循環,分化成不同的組織。巨噬細胞參與細菌和受損細胞的檢測和吞噬。此外,巨噬細胞通過釋放細胞因子引發炎癥,細胞因子激活血管細胞,促進細胞因子粘附血管并遷移到組織中。分化的 THP-1 細胞已被廣泛用于體外巨噬細胞模型研究巨噬細胞參與炎癥反應。人單核細胞系 THP-1 可以通過佛波醇 12-十四酸酯 13-乙酸酯 (PMA) 分化成巨噬細胞,并通過 LPS 活化。活化的 THP-1 細胞改變形態,分泌炎性細胞因子。監測細胞因子的表達水平是炎癥細胞模型的重要生理指 標。我們提出了多參數細胞分析的結果,使用表型成像考察巨噬細胞形成和低體積ELISA 分析細胞因子的分泌,以評估藥理學化合物對炎癥反應的影響。PMA 和 LPS刺激 THP-1 細胞 48 小時。PMA 和 LPS 激活 THP-1 細胞后,IL-8、IL-1b 和 TNF-a升高。為了評估抗炎化合物,細胞在激活前分別接受激酶抑制劑 SB202190 和 PDTC以及抗生素莫西沙星的處理。然后,通過定量細胞因子分泌量來測定這些抗炎化合物對炎癥反應的抑制作用。利用表型成像觀察了巨噬細胞形成的影響。與報道的作用機制一致,化合物 SB202190、PDTC 和莫西沙星的細胞因子表達呈濃度依賴性下降。
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