產品名稱：WinSera®優級免分裝胎牛血清

貨號：FBS50-WS-002

規格：50ml*10

產品特點：

1、50ml規格，無需分裝，降低污染可能性。

2、三次0.1μm無菌過濾。

3、高品質低內毒素，適合多種細胞培養

4、高性價比，批次差異小，質量穩定。

WinSera胎牛血清，50ml規格便捷裝，遠離分鐘污染風險，即取即用。

§細胞抱團怎么處理?

一些懸浮細胞抱團生長是正常現象，大部分懸浮細胞在細胞密度很高的情況下，很可能會出現部分細胞抱團生長的現象，聚團細胞很容易死亡并演化成絮狀物，殃及周圍的懸浮細胞，因此在培養懸浮細胞時需控制好細胞密度。如果出現了細胞團，可以通過細胞篩去掉部分較大的細胞團，也可以嘗試一下方法：將細胞懸液收集到15 ml離心管中，靜置20 min左右，小心取上層細胞上清培養(該方法只能去除部分較大的細胞團)。

§細胞內有空泡，是否是正常現象?

部分細胞本身存在一定的空泡(如HepG2，Ishikawa及一些耐藥株等)，這個是正常現象。如果只有少數細胞有內出現極少空泡，則很可能是細胞狀態不佳，可以通過調整血清濃度，控制消化，控制傳代比例及時間等方法來調整細胞狀態;如果大部分細胞出現空泡，且單個細胞內空泡數目偏多，則可能細胞代次較高，細胞老化所致，需更換代次較早的細胞。

§細胞傳兩代后開始逐漸死亡的原因

很可能是培養體系不適合細胞(未使用推薦的培養體系);或者消化過度，對細胞有嚴重影響;或者是傳代比例不合適(具有密度依賴性的細胞，傳代太稀;或者生長較快的細胞，傳代較密，細胞嚴重堆疊生長)。

§細胞生長逐漸變慢是什么原因?

細胞增殖變慢有以下原因：1. 消化過度 2. 傳代過密 3.細胞營養不良 4.細胞頻繁傳代 5.細胞狀態不佳或老化 6.細胞存在污染。

§培養細胞時應使用5%或10%CO2?

一般培養基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作為pH的緩沖系統，而培養基中NaHCO3的含量將決定細胞培養時應使用的CO2濃度。當培養基中NaHCO3含量為每公升3.7 g時，細胞培養時應使用10% CO2;當培養基中NaHCO3為每公升1.5 g時，則應使用5% CO2培養細胞。

§CO2培養箱之水盤如何保持清潔?

定期(每周一次)更換水盤里面的水，水盤的水必須使用無菌蒸餾水或無菌去離子，水盤中可添加1%硫酸銅以預防霉菌污染。

§細胞接種密度多少合適?

依照細胞株基本數據上的接種密度或稀釋分盤的比例接種即可。細胞數太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長的一個重要原因。按照我們的經驗：一般倍增時間24 h內的細胞，傳代比率1:6-1:12為宜，倍增時間24-48 h的細胞，傳代比率1:3-1:8為宜，倍增時間超過48h的細胞, 傳代比率1:2-1:4為宜。因此選擇正確的，靠譜的胎牛血清及廠家極其重要↓↓↓↓

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相關血清：WinSera®優級免分裝胎牛血清目錄如下：

DECO0109

WS10001CHO倉鼠卵巢細胞

WS10002CHO-K1倉鼠卵巢細胞亞株

WS10003BHK-21 [C-13]倉鼠腎成纖維細胞

WS10004CHL倉鼠肺細胞

WS10005V79倉鼠肺細胞

WS10006R 1610倉鼠肺細胞

WS10007CHO/dhFr-倉鼠卵巢細胞,二氫ye酸還原酶缺陷

WS10008Lec1倉鼠卵巢細胞

WS10009CTLA4 Ig-24中國倉鼠卵巢細胞

WS10010CHO-HCV-C 中國倉鼠卵巢癌細胞系

WS10011CHO-HCV-E1 中國倉鼠卵巢癌細胞系

WS10012CHO-HCV-E2 中國倉鼠卵巢癌細胞系

WS10013CHO-HCV-p7 中國倉鼠卵巢癌細胞系

WS10014CHO-HCV-NS2 中國倉鼠卵巢癌細胞系

WS10015CHO-HCV-NS3中國倉鼠卵巢癌細胞系

WS10016CHO-HCV-NS4A 中國倉鼠卵巢癌細胞系

WS10017CHO-HCV-NS4B 中國倉鼠卵巢癌細胞系

WS10018CHO-HCV-NS5A 中國倉鼠卵巢癌細胞系

WS10019CHO-HCV-NS5B 中國倉鼠卵巢癌細胞系

WS10020MR1 [derivative of HB-11048]中國倉鼠X小鼠B淋巴細胞雜交瘤

WS10021BHK 敘利亞倉鼠腎細胞2n=42

WS10022HIT-T15 敘利亞倉鼠胰島β細胞

WS10023BRL大鼠肝細胞

WS10024CBRH-7919大鼠肝癌細胞

WS10025H9C2大鼠心肌細胞

WS10026PC-12大鼠嗜鉻細胞瘤細胞（未分化）

WS10027SHZ-88大鼠乳腺癌細胞

WS10028H4-ⅡE 大鼠肝癌細胞系

WS10029HBZY－1 大鼠腎小球系膜細胞EC

WS10030MADB106  大鼠乳腺腺癌細胞系

WS10031A7r5大鼠胸大動脈平滑肌細胞

WS10032L6大鼠成肌細胞

WS10033NR8383大鼠肺泡巨噬細胞

WS10034RH-35 大鼠肝癌細胞

WS10035BRL 3A大鼠肝細胞

WS10036UMR-106大鼠骨肉瘤細胞

WS10037Y3-Ag 1.2.3大鼠骨髓瘤細胞

WS10038C6大鼠膠質瘤細胞

WS10039PC-12(低分化)大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(低分化)

WS10040PC-12(高分化)大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(高分化)

WS10041NRK大鼠腎細胞

WS10042NRK-52E大鼠腎細胞

WS10043RBL-2H3大鼠嗜堿性細胞白血病細胞

WS10044RSC96大鼠雪旺細胞

WS10045RIN-m5f 大鼠胰島細胞

WS10046RBL-1 大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞

WS10047RMSC-bm SD大鼠骨髓MSC細胞

血清使用需要注意的問題

（一）被誤判為污染的“小黑點”

經過熱處理的血清，往往沉淀物會增多，而這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察像是污染物，常常會讓研究者誤以為血清遭到污染。然而，把血清放在37℃環境中，又會使此沉淀物進一步增多，使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。

我們的經驗是拿到鏡下去觀察是否為細菌狀或真菌狀形態。還有就是做無菌培養，取一點血清在培養皿中，在培養箱里培養幾天，觀察沉淀物是否有變化。一般情況下，這些沉淀物并不會影響血清的正常使用，Lab里往往用0.22μM的濾膜過濾一下就繼續使用了。

（二）解凍血清

解凍血清時，請遵循推薦的分步解凍方法（-20℃→4℃→室溫）。實驗表明，如果血清解凍溫度過高（如-20℃→37℃），很容易產生沉淀。解凍血清時，請隨時搖勻，使溫度和成分均勻，減少沉淀的發生。請不要長時間將血清放置在37℃環境中，如果放置時間過長，血清會變得混濁，血清中的許多不穩定成分會受到破壞，從而影響血清的質量。血清的熱滅活很容易引起沉淀物的增加，我們認為這一步是不必要的。如需對血清進行熱滅活，請遵循56℃、30min原則，隨時搖勻。如果溫度過高、時間過長或搖晃不均勻，沉淀物就會增加。

血清中出現沉淀物的原因有很多，但最常見的是血清中脂蛋白的變性，解凍后血清中還會存在纖維蛋白（形成凝塊的蛋白質之一），這也是產生沉淀物的主要原因之一。然而，這些絮狀沉淀物雖然并不影響血清本身的質量，但有可能會被誤判為污染物。如果要去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝在無菌離心管中，以1200rpm的速度離心，然后將上清液加入培養基中進行過濾。

（三）保存血清

避免血清出現非污染性沉淀物的最好方法就是減少血清反復凍融的次數，所以血清少量分裝凍存是一個好方法。建議血清保存在-20～-5℃之間。如果以4℃保存，不要超過一個月。如果一次不能用完一瓶，建議將血清分裝到無菌離心管中，然后再凍存。

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