平板克隆形成實驗服務
- 公司名稱 上海達為科生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號
- 產地
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2024/11/13 10:36:39
- 訪問次數 55
聯系方式:張18017847121 查看聯系方式
聯系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!
平板克隆形成實驗服務
平板克隆形成實驗可以檢測貼壁細胞的克隆形成能力,克隆形成試驗可反映細胞群體依賴性和增殖能力。一般細胞在體外增殖六代以 上,其后代形成的細胞群體稱為細胞集落或克隆。每個克隆由單一細胞而來,含有50個以上細胞大小在0.3-1mm之間。通過克隆形成可檢測各種理化因素對細胞克隆形成能力的影響。
平板克隆形成實驗服務基本步驟:
1.取對數生長期的各組細胞,分別用0.25%yi蛋白酶消化并吹打成單個細胞并把細胞縣浮在10%胎牛血清的DMEM培養液中衡用。
2.將細胞縣液作梯度倍數稀釋,每組細胞分別以每皿50、100、200個細胞的梯度密度分別接種合10mL 37"C預溫培養液的皿中,并輕輕轉動,使細胞分散均勻。置37C、5% CO2及飽和溫度的細胞培養箱中培養2-3周。
3.經常觀察,當培養皿中出現肉眼可見的克隆時,終止培養。棄去上清液,用PBS小心浸洗2次。加甲醛固定細胞5ml固定15分鐘。然后安固定液加適量GIMSA應用染色液染10-30分鐘然后用流水緩慢洗去染色源,空氣干燥。
4.將平皿倒置并疊加一張帶網格的適明膠片,用肉眼直接計數克隆或在顯微鏡(低倍鏡)計數大于10個細胞的克隆數,再計算克隆形成率,克隆形成率=克隆數/接種細胞數。
服務流程:
1)項目方案的確定,包括目的細胞、 細胞處理方式及處理時間等;
2)細胞培養;
3)克隆形成實驗;
4)克隆形成實驗圖片及實驗報告。