雞氣管上皮細胞
參考價 | ¥1-¥6200/件 |
- 公司名稱 上海研生實業(yè)有限公司
- 品牌其他品牌
- 型號
- 所在地上海市
- 廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
- 更新時間2024/11/7 13:47:56
- 訪問次數(shù) 106
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
---|---|---|---|
貨號 | YS-01X7044 | 主要用途 | 僅供科研研究實驗 |
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
氣管組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7044 |
細胞簡介:
雞氣管上皮分離自氣管組織;氣管(Trachea),呼吸器官的一部分;為后壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣,與環(huán)狀軟骨相連;向下至第四、五胸椎體(相當胸骨角平面)交界處,分左、右主支氣管,分叉處稱為氣管杈。氣管主要由14-16個半環(huán)狀軟骨構(gòu)成,有彈性,軟骨為“C”字形的軟骨環(huán),缺口向后,各軟骨環(huán)以韌帶連接起來,環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結(jié)締組織連接,保持了持續(xù)張開狀態(tài)。管腔襯以粘膜,表面覆蓋纖毛上皮,粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒,纖毛不斷向咽部擺動將粘液與灰塵排出,以凈化吸入的氣體。氣管上皮是氣道與外界環(huán)境接觸的道防線,不僅是各種病原體、炎癥介質(zhì)作用的靶細胞,還作為效應細胞合成、釋放多種炎性介質(zhì)和細胞因子從而參與氣道炎癥及免疫反應。體外培養(yǎng)的原代氣管上皮細胞因與體內(nèi)組織在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動上存在很大的相似性,因此,在基礎(chǔ)及臨床研究中極為重要。
方法簡介:
公司實驗室分離的雞氣管上皮采用-連酶蛋白酶混合消化法,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的雞氣管上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠免疫球蛋白D 英文名稱: Mouse Immunoglobulin D 規(guī)格: 英文縮寫: IgD
小鼠吲哚胺2,3過氧化酶 英文名稱: Mouse Indoleamine 2, 3-Dioxygenase 規(guī)格: 英文縮寫: IDO
小鼠核因子κ B調(diào)控抑制蛋白 英文名稱: Mouse Inhibitor κ Binding 規(guī)格: 英文縮寫: IKBA
小鼠白細胞間介素 1 英文名稱: Mouse Ierleukin 1 規(guī)格: 英文縮寫: IL-1
小鼠去甲(NA)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human urease related protein C (UreC) ELISA Kit 人尿素酶相關(guān)蛋白C(UreC)試劑盒
Humanai-Actinaibody,AAAELISAKit 人抗肌動蛋白抗體(AAA)試劑盒 96T/48T 進口分裝
guineapigniicoxide,NO試劑盒豚鼠(NO)試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌/酵母細胞可溶性總核蛋白制備試劑盒20次
Mousebradykinin,BKELISAKit小鼠血管舒緩激肽(BK)試劑盒規(guī)格:96T/48T
RAS癌基因相關(guān)蛋白RAB17抗體
脊髓小腦共濟失調(diào)10抗體
EPHB1重組食蟹猴 EphB1 / EPHT2 蛋白 Protein
IL-7Ra/CD127 peptide 白細胞介素-7受體a抗原 0.5mgIL-7Ra/CD127 peptide 白細胞介素-7受體a抗原
PLTP重組人 PLTP 蛋白 Protein
CRIP2 Protein Human 重組人 CRIP2 蛋白 (His & GST 標簽)
TNFRSF1A Protein Mouse 重組小鼠 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A 蛋白 (Fc 標簽)
IL-7Ra/CD127 peptide 白細胞介素-7受體a抗原 0.5mgIL-7Ra/CD127 peptide 白細胞介素-7受體a抗原
CRIP2 Protein Human 重組人 CRIP2 蛋白 (His & GST 標簽)
EPHB1重組食蟹猴 EphB1 / EPHT2 蛋白 Protein
TNFRSF1A Protein Mouse 重組小鼠 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A 蛋白 (Fc 標簽)
PLTP重組人 PLTP 蛋白 Protein
雞氣管上皮細胞大鼠補體因子D(adipsin)(CFD)試劑盒 ,英文名: CFD ELISA Kit
Mouse substance P receptor (SP-R) ELISA Kit 小鼠P物質(zhì)受體(SP-R)試劑盒
ELISA 小鼠D-二聚體(mouse D-Dimer) 進口分裝
CLIAKitforLAT(MouseLinkerforactivationofTcell)ELISAKit小鼠T細胞活化連接蛋白
通用型VZV(VARICELLAZOSTER)病毒定性試劑盒20次
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行