CC96193 DH10B plus
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- 公司名稱 上海語純生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 CC96193
- 產地
- 廠商性質 經銷商
- 更新時間 2024/11/4 16:52:38
- 訪問次數 39
產品標簽
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供貨周期 | 現貨 |
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DH10B-Plus 感受態細胞用電擊法轉化的效率較高,故不推薦使用熱激法化學轉化。DH10B-Plus 菌
株來源于 DH10B 菌株,在 DH10B 菌株中引入 Hte 突變,提高了細胞膜的通透性和對瞬時高壓的耐
受進而提高了電擊轉化效率。DH10B-Plus 菌株適合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的 DNA
(無論真核生物還是原核生物的基因組 DNA 都能被高效的轉入 DH10B-Plus 中)。recA1 和 endA1 的
突變有利于插入 DNA 的穩定和高純度質粒 DNA 的提取, lacZΔM15 標記的存在使 DH10B-Plus 可
用于藍白斑篩選。DH10B-Plus 電擊感受態細胞具有鏈m素和四環s抗性,適用于大質粒的構建或
各種文庫構建,經特殊工藝處理,pUC18 質粒檢測轉化效率可達 1010 cfu/μg DNA。
產品組成
組分
DH10B-plus 感受態細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80 lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara, leu)7697
galE15 galK λ- rpsL nupG Hte (TetR)
存儲條件
-80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質量控制
無外源質粒 DNA 殘留;
化學法轉化效率≥1010 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態細胞從-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化;
2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態細胞中,輕輕彈勻,轉入冰上預冷的電擊轉化杯中;
3. 使用電轉儀進行電擊轉化(轉化參數為:2mm 電擊杯,2.5kv,200Ω,電轉化時間一般為 4-5 ms
左右);
4. 電擊后迅速取出電擊杯,向其中加入 900 μL 液體 LB 或 SOC 培養基(室溫或 37 ℃預熱),然后
置于 37 ℃搖床復壯 45 min;
5. 取不同體積的轉化產物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養箱培養過夜。
注意事項
1. 感受態細胞冰上解凍后應立即使用;
2. 加入的待轉化 DNA 不應含有較高的離子強度,建議總體積不超過 5 μl,一般為 1-2 μl;
3. 為確保優良轉化效率,電轉化杯一定要在冰上預冷;
4. 如使用 1 mm 電擊杯,則轉化參數改為 1.25 kv 和 200 Ω。