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CC96136 DH10Bac 感受態(tài)
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
- 公司名稱 上海語純生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 CC96136
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時間 2024/11/4 16:49:50
- 訪問次數(shù) 45
產(chǎn)品標(biāo)簽
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產(chǎn)品簡介
DH10Bac 菌株主要用于生產(chǎn)重組桿狀病毒分子(Bac-to-Bac 桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng))。該菌株中含有父
本 bacmid bMON14272 和輔助質(zhì)粒 pMON7124;其中, bMON14272 中包含 mini-F 復(fù)制子, 卡那抗
性基因, attTn7 位點(diǎn)和 lacZα 互補(bǔ)因子;而輔助質(zhì)粒 pMON7124 含有 tnsABCD 區(qū),可表達(dá)轉(zhuǎn)座蛋白
來幫助把供體質(zhì)粒上的 mini-Tn7 插入到父本的 bacmid 上的靶標(biāo)位點(diǎn)。當(dāng) DH10Bac 感受態(tài)細(xì)胞轉(zhuǎn)化
了在多克隆位點(diǎn)克隆了外源片段的供體質(zhì)粒(如 pFastBac)時,該菌株可生成復(fù)合 bacmid。DH10Bac
菌株攜帶 ?80lacZΔM15 突變,因此可用于藍(lán)白斑篩選實(shí)驗(yàn)。經(jīng) pUC18 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化檢測,DH10Bac 感
受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 108 cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
DH10Bac
化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:F- mcrA ?(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZ?M15 ?lacX74 recA1 endA1 araD139 ?(ara, leu)7697 galU galK λ- rpsL
nupG /pMON14272 / pMON7124
存儲條件
-80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
無外源質(zhì)粒 DNA 殘留
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;
2. 將待轉(zhuǎn)化DNA加入到100 μL感受態(tài)細(xì)胞中,輕輕彈勻,冰上孵育30 min;
3. 將離心管置于42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激90s后,立刻置于冰浴中靜置2-3 min;
4. 向離心管中加入900 μL LB或SOC培養(yǎng)基(室溫或37 ℃預(yù)熱),后置于37 ℃搖床復(fù)壯45 min;
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰浴中解凍后應(yīng)立即使用;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化DNA的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的1/10;
3. 加入待轉(zhuǎn)化DNA后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保優(yōu)良轉(zhuǎn)化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。