CC96124 HMS174 (DE3)感受態
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- 公司名稱 上海語純生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 CC96124
- 產地
- 廠商性質 經銷商
- 更新時間 2024/11/4 9:37:26
- 訪問次數 38
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產品簡介
HMS174菌株是大腸桿菌K-12的衍生菌株,含有recA突變。HMS174(DE3)含有溶原的λDE3序列,
可表達 T7 RNA 聚合酶,因而適用于 pET 系列載體及其他 T7 啟動子系列的載體。與 BLR(DE3)類
似(詳見#CC96123),可穩定表達那些能夠導致噬菌體 DE3 序列丟失的特定基因。此外,該菌株
攜帶利福m素抗性。經 pUC18 質粒轉化檢測,HMS174 (DE3)感受態細胞的轉化效率可達 107 cfu/μg
DNA 以上。
產品組成
組分
HMS174 (DE3)
化學感受態細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:FrecA1 hsdR (rK12- mK12+) (DE3) (Rif R)
存儲條件
-80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質量控制
無外源質粒 DNA 殘留;
化學法轉化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態細胞從-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;
2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態細胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90s 后,立刻置于冰浴中靜置 2-3 min;
4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養基(室溫或 37 ℃預熱),后置于 37 ℃搖床復壯 45 min;
5. 取不同體積的轉化產物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養箱培養過夜。
注意事項
1. 感受態細胞冰浴中解凍后應立即使用;
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態細胞體積的 1/10;
3. 加入待轉化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態細胞,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保優良轉化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。