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CC96114 Origami 2 (DE3) pLysS感受態

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     上海語純生物科技有限公司依托建立,是由具有資深生命科學、生物技術背景及人員共同創辦的技術型企業。
     公司專業經營生物科學領域的實驗儀器、研究試劑和實驗室耗材,致力于向國內外生物科學研究人員提供優質的服務。
     目前,公司推出的產品涵蓋了生物化學、分子生物學、免疫學、細胞生物學等相關領域,因優質穩定、性價比高等特點在廣大科研機構、研究院校及相關企業中贏得了良好的聲譽,從而建立了立體的營銷網絡和擁有廣泛的客戶資源。

    公司向廣大用戶提供優質產品的同時,始終將客戶服務和技術支持放在比產品銷售更重要的位置上,公司聘請了專職、技術支持人員,為客戶提供專業性、個性化的技術服務。公司秉承"先做人,后做事"的理念,堅持"以質量為生命,以客戶為中心"的宗旨,把優質的產品和貼心的服務奉獻給廣大客戶。





細胞,培養基,試劑,耗材儀器

產品簡介
Origami 2 系列菌株是由 K-12 菌株衍生而來,在 thioredoxin reductase (trxB)和 glutathione reductase
(gor)基因上同時含有突變,這使得該菌株能夠更加高效地表達含二硫鍵的蛋白。與 Origami 系列菌
株相比,Origami 2 對卡那抗生素敏感,因而能夠用于含卡納抗性質粒的轉化。該菌株攜帶的 gor
基因突變使得其和原來的 Origami(DE3)菌株一樣具有四環素抗性。該菌株含有溶源的 λDE3 
列,可表達 T7 RNA 聚合酶,因而適用于 pET 系列及其他 T7 啟動子系列載體。該菌株含有的
pLysS 質粒(氯m素抗性)能夠產生 T7 溶菌m,可以有效降低目的蛋白的本底表達水平。pLysS
質粒的起始復制位點是 p15 Origin, 這使得該質粒能和 pUC-及 pBR322-的衍生質粒共存。經 pUC18
質粒轉化檢測,Origami 2 (DE3)pLysS 感受態細胞的轉化效率可達 10cfu/μg DNA 以上。
產品組成
組分 
Origami 2 (DE3)pLysS
感受態細胞
10 × 100μL
100 × 100μL
定制
基因型:Δ(ara-leu)7697 ΔlacX74 ΔphoA PvuII phoR araD139 ahpC galE galK rpsL ’ [laclacIpro] (DE3) gor522::Tn10
trxB pLysS (CamR, StrR, TetR)
存儲條件
-80 ℃保存,請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質量控制
除 pLysS 質粒外,無外源質粒 DNA 殘留;
化學法轉化效率≥10cfu/μg pUC18 DNA
使用方法
1. 將感受態細胞從-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;
2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態細胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90s 后,立刻置于冰浴中靜置 2-3 min
4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養基(室溫或 37 ℃預熱),后置于 37 ℃搖床復壯 45 min
5. 取不同體積的轉化產物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養箱培養過夜。
注意事項
1. 感受態細胞冰水浴中解凍后應立即使用;
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態細胞體積的 1/10;
3. 加入待轉化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態細胞,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保優良轉化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。




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