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CC96180 Tuner(DE3)感受態(tài)
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
- 公司名稱 上海語純生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào) CC96180
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時(shí)間 2024/11/1 11:02:24
- 訪問次數(shù) 29
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產(chǎn)品簡介
Tuner(DE3)菌株是 BL21 菌株的 lacZY 基因 (半乳糖苷透性酶基因)突變株,此突變導(dǎo)致 IPTG 以均一
速度進(jìn)入體系中大腸桿菌的每個(gè)細(xì)胞,產(chǎn)生更加嚴(yán)格、均一的濃度依賴。此菌株用于高效表達(dá)克
隆于含有噬菌體 T7 啟動(dòng)子的表達(dá)載體 (如 pET 系列)的基因。λ 噬菌體 DE3 區(qū)含有 T7 噬菌體 RNA
聚合酶,該區(qū)整合于 Tuner 的染色體上,所以稱為 Tuner(DE3),可同時(shí)表達(dá) T7 RNA 聚合酶和大腸
桿菌 RNA 聚合酶,可用于 pET 系列,pGEX,pMAL等質(zhì)粒的蛋白表達(dá)。Tuner(DE3)感受態(tài)細(xì)胞由
特殊工藝制作,pUC18 質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率達(dá) 107 cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
Tuner(DE3)感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:F- ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm lacY1 λ(DE3)
存儲(chǔ)條件
-80 ℃保存;請(qǐng)勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
無外源質(zhì)粒 DNA 殘留;
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化;
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動(dòng),熱激 90s 后,立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min;
4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預(yù)熱),然后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min;
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10;
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保優(yōu)良轉(zhuǎn)化效率,整個(gè)操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔