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化工儀器網>產品展廳>技術服務>細胞生物學服務>細胞培養服務>EC96316 MSU440感受態(電轉)

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EC96316 MSU440感受態(電轉)

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     上海語純生物科技有限公司依托建立,是由具有資深生命科學、生物技術背景及人員共同創辦的技術型企業。
     公司專業經營生物科學領域的實驗儀器、研究試劑和實驗室耗材,致力于向國內外生物科學研究人員提供優質的服務。
     目前,公司推出的產品涵蓋了生物化學、分子生物學、免疫學、細胞生物學等相關領域,因優質穩定、性價比高等特點在廣大科研機構、研究院校及相關企業中贏得了良好的聲譽,從而建立了立體的營銷網絡和擁有廣泛的客戶資源。

    公司向廣大用戶提供優質產品的同時,始終將客戶服務和技術支持放在比產品銷售更重要的位置上,公司聘請了專職、技術支持人員,為客戶提供專業性、個性化的技術服務。公司秉承"先做人,后做事"的理念,堅持"以質量為生命,以客戶為中心"的宗旨,把優質的產品和貼心的服務奉獻給廣大客戶。





細胞,培養基,試劑,耗材儀器

產品簡介
發根農桿菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)農桿菌屬(agrobacterium)的一種革蘭氏陰性土壤細菌,它能夠
感染大多數雙子葉植物和少數單子葉植物以及個別裸子植物。 MSU440 發根農桿菌菌株含有農桿
堿型 Ri 質粒,具有廣泛的宿主范圍(玉米,煙草,茶樹,青蒿等),同時具有鏈m素抗性。本公
司生產的 MSU440 電轉化感受態細胞經特殊工藝制作,pCAMBIA2301 質粒(卡那n素抗性)檢 測,
轉化效率>10cfu/μg DNA
產品組成
組分
MSU440
電轉感受態細胞
10 ×50 μL
100 ×50 μL
定制
基因型:Agrobacterium rhizogenes(Str) MSU440 Ri (agropine type)
存儲條件
-80 ℃保存請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質量控制
除農桿堿型 Ri 質粒外,無外源質粒 DNA 殘留;
電轉法轉化效率≥10cfu/μg DNA
使用方法
1. 將新的 2 mm 電擊杯插入冰中預冷;或者將儲存于 75%乙醇中的 2 mm 電擊杯和杯蓋取出,在超凈工
作臺中將其倒置于干凈的吸水紙上,使乙醇充分揮發,然后插入冰中預冷;
2. -80℃保存的農桿菌感受態插入冰中待其融化,加入 0.01-1 μg 質粒 DNA(體積不大于 5 μl),用
200 μl 槍頭將感受態-質粒混合物快速轉移到預冷的電擊杯中,蓋上杯蓋;
3. 開啟電轉儀,設置參數(2500 V 200 Ω25 μF),將電擊杯快速放入電轉槽中,電擊完成后快速插
入冰中,加入 900μl 無抗生素的 YEB 并將感受態細胞轉移到無菌空管中,28 ℃振蕩培養 2~3 小時。
(注:此電轉化參數為 Bio-rad 推薦,使用者也可使用電轉儀所推薦的 Protocol 進行操作)
4. 6000 rpm 離心一分鐘收菌,留取 100μl 左右上清將菌體輕輕吹勻,并涂布于含相應抗生素的 YEB 平板
上,倒置放于 28℃培養箱培養 2~3 天。
注意事項
1. 加入質粒時體積不應大于感受態體積的 1/10
2. 電轉感受態細胞中不可混入氣泡,轉化高濃度的質粒可相應減少最終用于涂板的菌量;
3. 平板上陽性克隆密度不宜過大,為了獲得大的菌落,應減少質粒用量或最終用于涂板的菌量;
4. MSU440 具有鏈m素抗性,不可用于具有鏈m素抗性質粒的轉化。




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