項目背景:
隨著組學技術的發展,蛋白質組學已經成生命科學研究中的重要分支。在研究復雜生物樣本中的蛋白質時,僅僅通過傳統的分子生物學技術已經無法滿足研究的需要。質譜技術(Mass Spectrometry, MS)因其高靈敏度和高精度等優點,成為蛋白質研究中的重要工具,特別是最近幾十年里,質譜技術在蛋白質鑒定以及定量服務中的應用更是得到了迅猛發展。
蛋白質鑒定的目的是確定樣本中存在哪些蛋白質,并獲取其序列信息。質譜技術可以準確地測定蛋白質或多肽的分子量,從而推定其氨基酸序列信息。在蛋白質鑒定的實驗流程中,經常利用液相色譜(LC)與質譜(MS/MS)聯用的技術,如LC-MS/MS,來分析和鑒定膠點或膠條中的蛋白質。
蛋白質定量分析則關注的是蛋白質的表達水平。質譜技術可以通過對特定肽段的信號強度進行測量,來計算蛋白質的相對或絕對濃度。標記定量方法,例如iTRAQ/TMT,通過特異性的標簽來區分和量化不同樣本中的蛋白質。非標記定量方法(Label-free)則不依賴標簽,而是通過比較質譜信號強度來定量蛋白質。
此外,還有諸如基于抗體的PRM(平行反應監測)技術,可用于特定蛋白質的靶向定量研究;而基于翻譯后修飾(如磷酸化、甲基化)的研究則可以揭示蛋白質的功能調控情況。
總的來說,蛋白質組學領域的這些技術服務,不僅能夠應用于蛋白質鑒定以及定量服務,還可以揭示其動態變化和相互作用,為疾病機理研究、生物標志物的篩選、藥物靶點的發現和驗證等領域提供了強有力的支持。隨著分析技術的持續進步和創新,未來蛋白質組學的應用前景將更加廣闊。
案例展示:
質譜用于互作蛋白質鑒定(CoIP樣本)
定量蛋白質組學技術
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