Hoechst 33342 染色液

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

Hoechst 33342/PI 雙染試劑盒（Hoechst 33342/PI Double Stain Kit）采用Hoechst 33342和碘化丙啶（PI）雙染的方法以區(qū)分凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞的試劑盒。其檢測(cè)原理是：細(xì)胞核熒光染料Hoechst 33342可以穿透細(xì)胞膜，嵌入雙鏈DNA后釋放藍(lán)色熒光。對(duì)于正常細(xì)胞，其可少許進(jìn)入細(xì)胞膜使其染上低藍(lán)色。而凋亡細(xì)胞由于細(xì)胞膜通透性增強(qiáng)，從而使得進(jìn)入凋亡細(xì)胞內(nèi)的Hoechst 33342明顯多于正常細(xì)胞，熒光強(qiáng)度比正常細(xì)胞要高。另外，細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí)染色質(zhì)會(huì)固縮，從而使得染料能更有效和聚集的結(jié)合于DNA，并且凋亡細(xì)胞膜上的p-糖蛋白泵功能受損而不能有效的將Hoechst 33342排除到細(xì)胞外使其在細(xì)胞內(nèi)的積累增加，這些特征都使得凋亡細(xì)胞經(jīng)染色后熒光會(huì)比正常細(xì)胞明顯增強(qiáng)。但細(xì)胞核熒光染料PI不能穿透細(xì)胞膜完整的正常細(xì)胞或凋亡細(xì)胞，即活細(xì)胞對(duì)PI染料拒染。而對(duì)于壞死細(xì)胞，其細(xì)胞膜的完整性在早期即已喪失，可被PI染色。

產(chǎn)品描述:

本產(chǎn)品為液體(1X)染色液，已經(jīng)過(guò) 0.1μm過(guò)濾，不含細(xì)菌、支原體等。

濃度：1mg/mL

規(guī)格:  1ml/支

有效期: 12個(gè)月

儲(chǔ)存溫度: -20℃ 

運(yùn)輸條件：低溫運(yùn)輸 

使用說(shuō)明

Hoechst 33342 使用介紹：

※  Hoechst 33342也被稱(chēng)為：bisBenzimide H33342 或者 HOE33342。

※  Hoechst 33342 是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料產(chǎn)品，對(duì)細(xì)胞的毒性相對(duì)較低。  

※  Hoechst 33342 染色經(jīng)常用在細(xì)胞凋亡檢測(cè)過(guò)程中使用，染色后可采用熒光顯微鏡進(jìn)行觀察或采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)。Hoechst 33342 也可用于普通細(xì)胞核染色使用或DNA染色過(guò)程使用。

※  Hoechst 33342 的最大激發(fā)波長(zhǎng)：346nm，最大發(fā)射波長(zhǎng)：460nm；Hoechst 33342 和 雙鏈DNA進(jìn)行結(jié)合后的最大激發(fā)波長(zhǎng)：350nm，最大發(fā)射波長(zhǎng)：461nm。 

※  Hoechst 33342可溶于水，溶解度可以達(dá)到 20mg/ml。

※  用于細(xì)胞核染色過(guò)程時(shí)，Hoechst 33342的工作濃度是：0.5-10ug/ml。Hoechst 33342 熒光染料能少許進(jìn)入細(xì)胞膜中，使喜寶媽們?nèi)旧系退{(lán)色，然而 凋亡細(xì)胞膜通透性增強(qiáng)，所以進(jìn)入凋亡細(xì)胞的 Hoechst 33342 要比正常細(xì)胞的量大，凋亡細(xì)胞熒光強(qiáng)度要比正常細(xì)胞的高，除此之外，凋亡細(xì)胞的染色體DNA 結(jié)構(gòu)發(fā)生改變后，使該染料可以更有效的與 DNA 進(jìn)行結(jié)合，且凋亡細(xì)胞膜上的 p-糖蛋白泵功能受到損傷后不可以有效的將 Hoechst 33342 排出到細(xì)胞外，使之在細(xì)胞內(nèi)積累增加，都會(huì)讓凋亡細(xì)胞的藍(lán)色熒光增強(qiáng)。然而 PI染料 是不能進(jìn)入到細(xì)胞膜完整的正常細(xì)胞以及凋亡細(xì)胞中，所以活細(xì)胞對(duì) PI染料拒染，但壞死細(xì)胞由于膜完整性在早期已經(jīng)被破損，所以是可以被PI染料進(jìn)行染色的。根據(jù)以上特性，用 Hoechst 33342 結(jié)合 PI染料對(duì)凋亡細(xì)胞進(jìn)行雙染色，就可以在流式細(xì)胞儀上將正常細(xì)胞、凋亡細(xì)胞以及壞死細(xì)胞進(jìn)行區(qū)別來(lái)。

※ 在雙變量流式細(xì)胞儀散點(diǎn)圖上，這三群細(xì)胞分別表現(xiàn)為：正常細(xì)胞為低藍(lán)色/低紅色（Hoechst 33342+/PI+），凋亡細(xì)胞為高藍(lán)色/低紅色（Hoechst 33342++/PI+），壞死細(xì)胞為低藍(lán)色/高紅色（Hoechst 33342+/PI++）。

注意事項(xiàng)

1. 實(shí)驗(yàn)前需戴好防護(hù)眼鏡，穿戴防護(hù)服和口罩，佩戴手套，避免與皮膚接觸。

2. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中如遇到有毒或者刺激性物質(zhì)及有害物質(zhì)產(chǎn)生，必要時(shí)實(shí)驗(yàn)操作需要手套箱內(nèi)完成以免對(duì)實(shí)驗(yàn)人員造成傷害。

3. 取樣品的移液槍頭需及時(shí)更換，必要時(shí)為避免交叉污染盡可能選擇濾芯吸頭。

4. 稱(chēng)量藥品時(shí)選用稱(chēng)量紙，并無(wú)風(fēng)處取藥和稱(chēng)量以免揚(yáng)撒，試劑的容器使用前務(wù)必確保干凈，并消毒。

5. 取藥品時(shí)盡量采用多個(gè)藥勺分別使用，使用后清洗干凈后，烘干消毒存放。

6. 實(shí)驗(yàn)后產(chǎn)生的廢棄物需分類(lèi)存儲(chǔ)，并交于專(zhuān)業(yè)生物廢氣物處理公司處理，以免造成環(huán)境污染。

購(gòu)買(mǎi)說(shuō)明

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