陶術  C0066  人 CD34 + 細胞富集試劑盒（陰性選擇）

陶術 人 CD34+細胞富集試劑盒（陰性選擇）

產品貨號：C0066

產品名稱：人 CD34 + 細胞富集試劑盒（陰性選擇）

產品規格：2mL (for 1×10^9 cells)

產品簡介：

TargetMol 的人 CD34+ 細胞分選試劑盒 (陰選) 提供超順磁性微珠，采用陰性分選法，從人外周血單個核細胞（PBMC）中分離出 CD34+ 細胞。原理是選用生wu素（biotin）標記的單克隆抗體對非目標細胞（非 CD34+ 細胞）進行標記，然后通過鏈霉親和素（streptavidin）標記的磁珠對非目標細胞進行清除，從而達到人外周血 CD34+ 細胞分選的目的。

具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準

活性高：分選后細胞功能保持完好，無異常激活，無抗體和磁珠標記。

易操作：無需使用分離柱，通過磁力架即可實現目標細胞分離。

速度快：最快 30 min 即可完成 CD34+ 細胞富集。

富集效率高：一步富集可達到10倍濃縮，兩步富集可達到 30 倍濃縮。

適用于從人臍帶血單個核細胞（CBMC）或外周血單個核細胞（PBMC）中富集 CD34+ 細胞。

操作說明：

制備人CBMC或PBMC：通過Ficoll密度梯度離心法從人臍帶血或人外周血中分離出單個核細胞，收集后用PBS洗滌細胞，離心。離心結束后，棄去上清液，將CBMC或PBMC重懸于分選緩沖液中，并調整細胞濃度至1×10^8個細胞/mL。

注：分選緩沖液推薦配方：PBS，含有2 mM EDTA和2% FBS；或PBS，2 mM EDTA和0.5% BSA。緩沖液需預先經0.22 μm濾膜過濾滅菌。

將100 μL的細胞懸液（含1×10^7個細胞）加入無菌流式管底部，再加入2 μL Biotin-Antibody Mix，混勻后在4°C下孵育10 min。

注：將細胞加入流式管底部時，避免沿管壁添加。若分選更多細胞，Biotin-Antibody Mix的用量需按比例增加。根據磁力架的不同，也可使用離心管進行細胞分選。

磁珠預處理：渦旋振蕩重懸磁珠，將所需量的磁珠移至1.5 mL離心管中，加入1 mL分選緩沖液，10000 g離心1 min，棄去上清。重復以上洗滌步驟一次。加入與原體積相同的分選緩沖液重懸磁珠。若使用20 μL磁珠進行清洗，則清洗后用20 μL分選緩沖液重懸。

細胞孵育結束后，在流式管中加入20 μL經過預處理的Streptavidin Magnetic Beads，混合均勻，4°C下孵育10 min。

注：若分選的細胞數量較多，Streptavidin Magnetic Beads的用量需按比例增加。例如，分選5×10^7個細胞時，在500 μL細胞懸液中加入10 μL Biotin-Antibody Mix和100 μL Streptavidin Magnetic Beads。若分選的細胞少于1×10^7個，則應將細胞懸液體積補至100 μL，并加入2 μL Biotin-Antibody Mix和20 μL Streptavidin Magnetic Beads。

孵育結束后，在流式管中加入2.5 mL分選緩沖液，用移液器輕輕吹打混勻5次，避免劇烈振蕩或上下顛倒混勻。

將裝有細胞的流式管置于磁力架上靜置5 min。

將含有純化CD34+細胞的細胞懸液輕輕倒入無菌離心管中，倒出過程中流式管保持在磁力架上。500 g離心5 min，棄去上清，收集細胞。

注：為進一步提高CD34+細胞的富集效果，可根據實驗需要重復步驟2-7一次。

根據實驗要求洗滌細胞后，將其重懸于所需的緩沖液或培養基中，便可用于后續的分子生物學或細胞生物學實驗。

保存條件：4℃，2年。

 陶術 人 CD34+細胞富集試劑盒（陰性選擇）

產品訂購信息：

C0066  人 CD34 + 細胞富集試劑盒（陰性選擇）  2mL (for 1×10^9 cells)

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