供貨周期 | 現貨 | 規格 | 100T |
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應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業,綜合 |
細胞凋亡是細胞的基本特征之一,它在機體的胚胎發育、組織修復、內環境的穩定和一些疾病發生過程等方面起著十分重要的作用。在正常細胞中,PS只分布在細胞膜脂質雙層的內側,而在細胞凋亡早期,細胞膜中的PS由脂膜內側翻向外側。在體內,巨噬細胞可以識別翻轉到細胞膜表面的PS 從而將這些程序性死亡的細胞清除,因此凋亡過程中并不伴隨局部的炎癥反應,而在細胞壞死的過程中則常常伴隨著炎癥反應。
AnnexinⅤ是一種分子量為35-36kD的Ca2+依賴性磷脂結合蛋白,能與細胞凋亡過程中翻轉到膜外的PS高親和力特異性結合。PS 外翻發生在細胞核破裂,DNA 片段化以及凋亡相關蛋白出現之前,這使得Annexin V 與PS 的結合成為凋亡早期的一種重要檢測標志事件。
檢測原理:
用標記了FITC的AnnexinⅤ作為熒光探針,利用流式細胞儀或熒光顯微鏡可檢測細胞凋亡的發生。細胞壞死的過程中也會發生細胞膜損傷,壞死的細胞會結合Annexin V-FITC。正常細胞和早期凋亡細胞的細胞膜是完整的,Propidium iodide(PI)是一種核酸染料,它不能透過完整的細胞膜,但在凋亡中晚期的細胞和壞死細胞,PI能夠透過細胞膜與細胞核結合呈現紅色。將AnnexinⅤ與PI匹配使用,可以將凋亡早期的細胞和晚期的細胞以及死細胞區分開來。壞死細胞可以同時與Annexin V-FITC 和PI 結合顯色,而PI 則被排除在活細胞(FITC 陰性)和早期凋亡細胞(FITC 陽性)之外。在沒有巨噬細胞的情況下,凋亡的最后階段會像細胞壞死一樣發生整個細胞的解體,從而使凋亡晚期的細胞也同時被FITC 和PI 結合染色呈現雙陽性。
貝博Annexin V-FITC / PI 細胞凋亡檢測試劑盒可以方便快捷的檢測凋亡細胞,使用流式細胞儀、熒光顯微鏡或其它熒光檢測設備進行檢測。
產品特點:
● 方便:可用流式細胞儀或熒光顯微鏡檢測;
● 快速:1小時內即可完成實驗;
● 準確:能準確區分活細胞、凋亡細胞和壞死細胞,并計數各群細胞的比例。
檢測方法:
流式細胞儀或熒光顯微鏡
Annexin V-FITC / PI 細胞凋亡檢測試劑盒樣本類型:
● 懸浮細胞
● 貼壁細胞
樣品染色:
1、 離心收集懸浮細胞。離心機300-500g,2-8°C,離心時間5min,棄培養基。
2、 用冷PBS洗滌細胞兩次。(300g,2-8°C,離心時間5min收集細胞)。
3、 用400ul 1X Annexin V結合液懸浮細胞,濃度大約為1 X 106 cells/ml。
4、 在細胞懸浮液中加入5ul Annexin V-FITC染色液,輕輕混勻后于2-8°C避光條件下孵育15分鐘。
5、 加入5-10ul PI染色液后輕輕混勻于2-8°C避光條件下孵育5分鐘。
6、 立即用流式細胞儀或熒光顯微鏡檢測。
流式細胞儀分析:
經處理過的細胞此時可以在流式細胞儀上分析。激發波長為488nm。
按照常規的流式凋亡檢測的操作即可。
Annexin V-FITC的綠色熒光發射波長530nm,信號可以通過FL1(FITC接收器)通道檢測;PI紅色熒光在620nm,通過FL2(Propidium iodide接收器)通道或FL3通道檢測。
BB-41033 Annexin V-APC / PI 細胞凋亡檢測試劑盒
BB-410332 Annexin V-APC / NucGreen 細胞凋亡檢測試劑盒
BB-41034 Annexin V-APC / 7-AAD 細胞凋亡檢測試劑盒
BB-41035 Annexin V Alexa Fluor 647 / PI 細胞凋亡檢測試劑盒
BB-41036 Annexin V Alexa Fluor 647 / 7-AAD 細胞凋亡檢測試劑盒
BB-410362 Annexin V Alexa Fluor 647 / NucGreen 細胞凋亡檢測試劑盒
BB-41037 Annexin V Alexa Fluor 660 / PI 細胞凋亡檢測試劑盒
BB-41038 Annexin V Alexa Fluor 660 / 7-AAD 細胞凋亡檢測試劑盒
BB-410382 Annexin V Alexa Fluor 660 / NucGreen 細胞凋亡檢測試劑盒
BB-41039 Annexin V-PE-Cyanine5 細胞凋亡檢測試劑盒
BB-4104 細胞周期檢測試劑盒(PI)
BB-41043 細胞周期檢測試劑盒
BB-41044 細胞周期檢測試劑盒