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化工儀器網(wǎng)>產(chǎn)品展廳>試劑標(biāo)物>生化試劑>抗體/抗原>100管/96樣 硝酸還原酶(NR)測試盒(NADH速率法)

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100管/96樣 硝酸還原酶(NR)測試盒(NADH速率法)

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 公司名稱 上海篤瑪生物科技有限公司
  • 品牌 DUMABIO/篤瑪生物
  • 型號 100管/96樣
  • 產(chǎn)地 上海
  • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
  • 更新時(shí)間 2024/9/12 9:09:57
  • 訪問次數(shù) 183

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上海篤瑪生物科技有限公司是一家從事生物學(xué)試劑及試劑盒的高科技生物企業(yè)。

總部位于上海,并在全國設(shè)有經(jīng)銷或代理機(jī)構(gòu)。產(chǎn)品因可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和較為完善的售后服務(wù)確立了篤瑪生物良好的品牌形象。公司秉承以客戶為中心、以產(chǎn)品為保障、以誠信為基礎(chǔ)、以創(chuàng)新為宗旨的發(fā)展理念,擁有專業(yè)的研發(fā)和質(zhì)量檢測團(tuán)隊(duì)以及倉儲和物流系統(tǒng)。篤瑪生物已經(jīng)得到全國科研工作者的認(rèn)可,成為廣大經(jīng)銷商推崇的品牌。

公司擁有一批專業(yè)的研發(fā)人員,我們專注于生物產(chǎn)品的不斷完善和創(chuàng)新。產(chǎn)品覆蓋面廣,品質(zhì)可靠。先后開發(fā)了涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、生物醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的多種試劑及試劑盒。同時(shí),提供各種常規(guī)生化試劑,庫存常備產(chǎn)品多達(dá)10000多種,可隨時(shí)為廣大科研工作者提供各類專業(yè)試劑。在質(zhì)量方面,謹(jǐn)記公司信念:質(zhì)量高于一切。所有研發(fā)的產(chǎn)品都設(shè)有嚴(yán)謹(jǐn)?shù)纳a(chǎn)流程,科學(xué)的質(zhì)量檢測方法和成熟的質(zhì)量檢測程序,我們恪守對每一位用戶的承諾:用專業(yè)的態(tài)度做專業(yè)的品牌。同時(shí),公司組建了一支專業(yè)的技術(shù)服務(wù)隊(duì)伍,能夠?yàn)榭蒲泄ぷ髡咛峁I(yè)的技術(shù)服務(wù)。每一位購買篤瑪生物產(chǎn)品的用戶都能夠得到專業(yè)的咨詢和完善的售后服務(wù)。

上海篤瑪生物科技有限公司堅(jiān)持與國際接軌,注重和國際企業(yè)的合作與交流,目前已經(jīng)和Sigma、Life、Amresco、abcam、CST、santa、Corning、R&D、Millipore、AAT、Applichem、以及Dragon等企業(yè)結(jié)成緊密的合作關(guān)系,并提供產(chǎn)品代理、市場咨詢等多項(xiàng)服務(wù)。公司將一如既往與世界更多品牌合作,不斷為廣大生物科研工作者提供更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù)。


ELISA試劑盒,標(biāo)準(zhǔn)品,生化試劑,檢測服務(wù)

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 96T/48T
貨號 DM-W-NR 主要用途 科研實(shí)驗(yàn)

硝酸還原酶(NR)測試盒(NADH速率法)

本品用于科研實(shí)驗(yàn),不用于臨床。

如何處理ELISA測定抗體疫苗的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)?

在ELISA試劑盒試驗(yàn)中我們總是碰到許多關(guān)于數(shù)據(jù)處理的難題,為了能我們更多更具體的了解在試驗(yàn)中數(shù)據(jù)處理的問題,下面一起來看看ELISA測定抗體之怎么處理試驗(yàn)數(shù)據(jù)。

ELISA做得很好的話批間CV都要有10~15%左右,用同一個(gè)抗原,但對于包被的抗原濃度對OD的影響不是很大,只要不是不同太大即可。抗血清當(dāng)然要用同一個(gè)稀釋度了。別的比較的話就必每批,每塊板上的樣品都要伴隨著一個(gè)參比品一同做,參比品仍是同一個(gè)這樣才干確保試驗(yàn)成果的可比性。

剖析:

(1)將同一只動(dòng)物免疫不同時(shí)刻后抗體產(chǎn)生的效價(jià)進(jìn)行比較。

(2)由上面能夠得出一組數(shù)據(jù),舉個(gè)比如即如某個(gè)免疫間期抗體升高2倍的有多少,升高4,8,16...的各有多少,然后可知大多數(shù)情況下可升高多少,即此種升高率的陽性率,然后再用泊松散布證明此陽性率是否贊同整體在這個(gè)免疫間期增高的陽性率,仍是由于隨機(jī)誤差的原因使試驗(yàn)得到了這個(gè)成果。

(3)計(jì)算出不同間期的效價(jià)水平后,能夠用方差剖析進(jìn)行整體比較,證明不同間期免疫的作用差異是否有計(jì)算學(xué)含義;然后再兩兩之間進(jìn)行比較,看免疫作用*顯著的是哪個(gè)間期。


ELISA試劑盒酶標(biāo)板在什么情況下會(huì)失效?


       ELISA試劑盒的保質(zhì)期一般都是在一年,如果保存妥當(dāng)?shù)脑挘粫?huì)出現(xiàn)問題的。但不要重復(fù)凍融。當(dāng)然如果是正常的DAS-ELISA檢測試劑盒等,應(yīng)該放在4℃左右冰箱保存。主張ELISA試劑盒凍結(jié)后一次用完。已開封或許運(yùn)用后,剩下試劑仍需依照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存,ELISA檢測試劑盒開封后的酶標(biāo)板要加干燥劑后密封保存于-20℃,防止?jié)駶櫋?/span>


       但要留意的是,如果將ELISA試劑盒剛從冰箱里邊拿出來就當(dāng)即運(yùn)用的話,可能會(huì)影響,其直接的后果是對一些弱陽性標(biāo)本的檢測出現(xiàn)假陰性。


       主張:先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20分鐘以上后,再進(jìn)行測定,以使試劑盒在ELISA檢測試劑盒運(yùn)用前與室溫平衡。這樣做的意圖,首要是為了在后面的溫育反響過程中,能使反響微孔內(nèi)的溫度能較快地到達(dá)所要求的高度,以滿意測定要求。


試劑盒規(guī)格中是100管和50管是什么意思?

(1)50/48:50管指能夠做50次測定,48樣指可以測試48個(gè)樣品。如果每個(gè)樣品重復(fù)測定3,那么只能測定16個(gè)樣品。其中有2次測定用于

空白管或者對照管。值得特別注意的是,50/24樣中由于每個(gè)樣品測定都需要做對照,因此能夠測定樣品的數(shù)量僅為8個(gè)(假設(shè)做3次重復(fù))

(2)100/96:100管指能夠做100次測定,96樣指可以測定96個(gè)樣品,如果每個(gè)樣品重復(fù)測定3,那么只能測定32個(gè)樣品。其中有4次測定用

于空白管或者對照管。注意由于瓶璧和移液器吸附等,通常要比理論測定次數(shù)少1~3次。其它規(guī)格的含義依次類推。值得特別注意的是,100

/48樣中由于每個(gè)樣品測定都需要做對照,因此能夠測定樣品的數(shù)量僅為16個(gè)(假設(shè)做3次重復(fù))

如何防止試劑盒失效?

  不要過早訂購,以免試劑盒失效.收到試劑盒后,檢查外包裝是否正常。馬上打開,按照試劑盒說明書核對試劑數(shù)量是否正確,注意瓶中試劑狀態(tài)是否與說明書一致。如果有問題,或者懷疑,馬上聯(lián)系公司銷售,進(jìn)行確認(rèn)。如果沒有問題,請務(wù)必按照說明書進(jìn)行試劑的保存。注意,不同試劑,可能需要分別保存在常溫(25°℃)4℃和-20,務(wù)必分別按照要求保存,不要整個(gè)試劑盒放置于冰箱。

如何進(jìn)行預(yù)測定?

(1)務(wù)必在7個(gè)工作日內(nèi)進(jìn)行預(yù)測定,以確定該試劑盒是否適合您的樣品,以免造成試劑盒和樣品的浪費(fèi)。

(2)選擇2~3個(gè)預(yù)期差異比較大的樣品,嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行操作,注意儀器工作狀態(tài),操作規(guī)范,控制好測定條件,尤其是溫度。

(3)如實(shí)與公司銷售溝通預(yù)測定結(jié)果,公司技術(shù)人員會(huì)確認(rèn)測定結(jié)果是否正常,是否需要調(diào)整,如何進(jìn)行調(diào)整,從而確保您的測定結(jié)果可靠。

熒 光 分 析 法

      熒光分析法是指利用某些物質(zhì)被紫外光照射后處于激發(fā)態(tài),激發(fā)態(tài)分子經(jīng)歷一個(gè)碰撞及發(fā)射的去激發(fā)過程所發(fā)生的能反映出該物質(zhì)特性的熒光,可以進(jìn)行定性或定量分析的方法。由于有些物質(zhì)本身不發(fā)射熒光(或熒光很弱),這就需要把不發(fā)射熒光的物質(zhì)轉(zhuǎn)化成能發(fā)射熒光的物質(zhì)。例如用某些試劑(如熒光染料),使其與不發(fā)射熒光的物質(zhì)生成絡(luò)合物,各種絡(luò)合物能發(fā)射熒光,再進(jìn)行測定。因此熒光試劑的使用,對一些原來不發(fā)熒光的無機(jī)物質(zhì)和有機(jī)物質(zhì)進(jìn)行熒光分析打開了大門,擴(kuò)展了分析的范圍。



比色皿有哪些規(guī)格?

(1)常量比色皿,1mL3mL,常量法試劑盒都是選用1mL體系,只能用1mL比色皿,不可以用更大體積的比色皿,否則試劑量不夠,無法正常比色。

(2)微量比色皿,0.25mL0.5mL,微量法試劑盒都是選用0.25mL比色皿。一般客戶都選擇使用標(biāo)儀(需要自備酶標(biāo)板)

(3)紫外波長檢測需要石英比色皿,不可以用普通玻璃比色皿。

(4)不同規(guī)格的比色皿,其外觀大小是一致的,都是1cm光徑(也有0.5cm光徑的比色皿,不常見,也可以用,但是計(jì)算時(shí)要注意修改計(jì)算公式),其內(nèi)

容積差異在于壁的厚度。

代測的優(yōu)點(diǎn)

(1)更加省事兒,不必為測定犯難。用戶只要提供樣品和想測定的指標(biāo),就不再需要為測定操心了,不再受到操作技能、儀器設(shè)備和時(shí)間

的限制,就等著拿到數(shù)據(jù)寫論文。

(2)測定數(shù)據(jù)更有保障。嚴(yán)格的測定質(zhì)量管理體系,從而保證了測定結(jié)果的真實(shí)可靠。我們還建立了定制度。

(3)防止樣品損失無論是用戶自己完成測定全過程,還是購買試劑盒完成測定,都可能因?yàn)槿狈y定經(jīng)驗(yàn),導(dǎo)致測定失敗,從而損失樣品的情況。對于生命科學(xué)研究而言,樣品是最珍貴的。樣品一旦損失,輕則造成研究進(jìn)度被耽擱,重則造成研究失敗!代測能夠充分保證測定成功,從而防止了樣品損失。當(dāng)然,樣品質(zhì)量是測定成功的前提,而且樣品質(zhì)量只有用戶自己才能控制和保證。

生化檢測試劑盒的基本原理

生化檢測試劑盒,又稱生化試劑盒,是利用特定的生物成分、動(dòng)力學(xué)及化學(xué)反應(yīng)等技術(shù)制備的試劑盒,用于檢測生理學(xué)、病理學(xué)、藥理學(xué)等領(lǐng)域中特定的生物分子或化學(xué)物質(zhì)。生化檢測試劑盒包括底物、酶試劑盒、探針等多個(gè)組成部分,其中的是底物-酶法

底物-酶法是生化檢測試劑盒檢測的基本原理。在該過程中,底物與酶在細(xì)胞膜上結(jié)合形成基質(zhì)酶,進(jìn)而形成底物-酶復(fù)合物。隨著時(shí)間的推

,底物-酶復(fù)合物逐漸分解,釋放出分子小的底物和分子大的未消化的底物。未消化的底物可以被一系列的酶代謝,同時(shí)底物、酶和代謝產(chǎn)物都會(huì)對復(fù)合物的穩(wěn)定性產(chǎn)生影響,從而影響檢測試劑盒的檢測結(jié)果。

生化試劑盒可以檢測的樣本類型有哪些?

 生化試劑盒的實(shí)驗(yàn)原理是基于化學(xué)反應(yīng),理論上是不受生物種屬及樣本類型的限制。生化試劑盒樣本檢測通常只分樣本類型,不分種屬。但是某些指標(biāo)在不同種屬或類型樣本中的提取方式不同。因此,具體情況請參見說明書或與技術(shù)支持聯(lián)系確認(rèn)。

生化試劑盒樣本檢測的一般要求:

1)于生化檢測而言,樣本最-好無溶血、脂血、黃-疸的現(xiàn)象。組織樣本需將血液洗凈擦干后再進(jìn)行稱重處理。

2)樣本處理后最-好盡快進(jìn)行檢測,且保存于冰盒之上,待測。

3)樣本需澄清,若不澄清,需離心后取上清進(jìn)行檢測(特殊指標(biāo)除外)

4)樣本值應(yīng)在試劑盒線性范圍內(nèi),若超過線性范圍,需稀釋后再進(jìn)行檢測,若低于檢測范圍,需增加樣本濃度后進(jìn)行檢測。

微 量 分 析 法  

     微量分析(Microanalysis)在化學(xué)分析中,其試樣重量為1-10mg的化學(xué)分析方法稱為微量分析。有微量定性分析和微量定量分析之分,定性常采用點(diǎn)滴反應(yīng)和顯微結(jié)晶反應(yīng)等靈敏度較高的分析方法,定量分析常用重量容量儀器等分析方法。在以試樣重量不同的分析分類中還有半微量分析和超微量分析等。


培養(yǎng)基的防霉以及霉后的處理方法

防霉辦法

1、培育果蠅的器皿要嚴(yán)格消毒。培育瓶洗潔凈后,自然涼干,再與棉塞一道進(jìn)行高溫枯燥滅菌(120℃,30min) 。

2、養(yǎng)分要全面。種類許多,本實(shí)驗(yàn)室用的是玉米培育基。

配方:

水750mL煮開,加瓊脂6.2g,待瓊脂溶解后加白糖62.5g,拌和溶解后加調(diào)成糊狀的玉米糊,煮開2~3min,加酵母粉7g,加熱1~2min,拌和均勻后,移去火源,加丙酸2mL。培育基稍稍冷卻后,倒入已滅菌的瓶中,盡量不要粘在瓶壁上,塞好棉塞,放入仍有余熱的枯燥箱中將瓶壁上的水蒸干。

3、接種時(shí)消好毒。在無菌室內(nèi)接種,如沒有無菌室,在接種前用75%酒精棉球擦雙手一遍。接種后,放入適宜果蠅成長溫度的培育箱中培育果蠅(溫度20~25℃),一旦下一代成蠅孵出來后,這樣就就不易長霉啦。

培育基的霉后處理辦法

由于霉菌孢子漂浮于培育瓶的整個(gè)空間,包括果蠅身上,如將此果蠅接種到新的里邊,大約經(jīng)過4 ~5d,培育基將會(huì)重新長出霉菌來。遇到該問題,解決的辦法只要兩種:① 不再接種這種長霉菌果蠅,重新接種未長霉的果蠅;② 采取辦法殺死果蠅身上的霉菌孢子。

殺霉菌辦法:

將帶有霉菌孢子的成蠅倒入空培育瓶中,棉塞上倒適量的75%酒精,再將瓶口塞緊,使用酒精具有蒸發(fā)性,蒸發(fā)后的酒精充滿整個(gè)瓶內(nèi),從而將果蠅身上的霉孢子殺死。

上海酶聯(lián)生物提醒注意:

1、倒在棉塞上的酒精量要適宜,過多果蠅易醉昏,過少殺死不了霉菌孢子;

2、果蠅呆在空瓶內(nèi)的時(shí)間要恰當(dāng),以2d為好。


硝酸還原酶(NR)測試盒(NADH速率法)


硝酸還原酶(NR)測試盒(NADH速率法)

本品用于科研實(shí)驗(yàn),不用于臨床。

測定意義:

輔酶NAD(H)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,NAD+是糖酵解(EMP)和三羧酸循環(huán)(TCA)的主要?dú)涫荏w,生成的 NADH 經(jīng)呼吸電子鏈(ETC)傳遞把電子交給氧,在合成 ATP 的同時(shí),形成大量的 ROS,同時(shí) NADH 再生為 NAD+。糖、脂、蛋白質(zhì)三大代謝物質(zhì)分解中的氧化反應(yīng)絕大部分通過這一體系完成。NAD(H)含量和 NADH/NAD+比值的高低可用于評價(jià)糖酵解和 TCA 循環(huán)的強(qiáng)弱。較高的NAD(H) NADH/NAD+比值說明細(xì)胞呼吸耗氧量較高,處于過氧化狀態(tài)。此外,NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和 TCA 循環(huán)。另外,NAD+降解產(chǎn)物對細(xì)胞信號傳導(dǎo)、代謝和基因表達(dá)等具有重要的調(diào)控作用。

測定原理:

分別用酸性和堿性提取液提取樣品中 NAD+ NADH,NADH 通過 PMS 的遞氫作用,還原氧化型噻唑藍(lán)(MTT)為甲瓚, 570nm 下檢測吸光值; NAD+可被乙醇脫氫酶還原為 NADH,進(jìn)一步采用 MTT 還原法檢測。

需自備的儀器和用品:

酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、移液器、96 孔板、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

酸性提取液:液體 50mL×1 ,4℃保存;

堿性提取液:液體 50mL×1 ,4℃保存;

試劑一:液體 10 mL×1 ,4℃保存;

試劑二:液體 3 mL×1 ,4℃保存;

試劑三:粉劑×1 ,-20 ℃保存,用時(shí)加入 3mL 蒸餾水,混勻,用不完的試劑 4℃保存一周;

試劑四:粉劑×1 ,4 ℃保存,用時(shí)加入 3mL 蒸餾水,混勻,用不完的試劑 4℃保存一周;

試劑五:液體 3.6mL×1 ,4 ℃保存;

試劑六:液體 30mL×1 ,4 ℃保存;

試劑七:液體 50mL×1 ,4 ℃保存。

NAD+ NADH 的提取:

1 血清(漿) NAD+ NADH 的提取:

NAD+的提取:按照血清(漿)體積(mL):酸性提取液體積(mL) 1:5~10 的比例(建議取約 0.1mL 血清(漿),加入 1mL 酸性提取液),95℃水浴 5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min; 500μL 上清液,加入 500μL 堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

NADH 的提取:按照血清(漿)體積(mL):堿性提取液體積(mL) 1:5~10 的比例(建議取約 0.1mL血清(漿),加入 1mL 堿性提取液),95℃水浴 5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min; 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

2 組織中 NAD+ NADH 的提取:

NAD+的提取:按照組織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(mL) 1:5~10 的比例(建議取約 0.1g 組織,加入 1mL酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴 5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min; 500μL 上清液,加入 500μL 堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

NADH 的提取:按照組織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(mL) 1:5~10 的比例(建議取約 0.1g 組織,加入 1mL堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴 5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min; 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

3 細(xì)胞或細(xì)菌中 NAD+ NADH 的提取:

NAD+的提取:先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104 個(gè)):酸性提取液體積(mL) 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 酸性提取液),超聲波破碎(冰浴,功率20% 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 ),95℃水浴 5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min; 500μL 上清液,加入 500μL 堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心

10min,取上清,置冰上待測。NADH 的提取:先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104 個(gè)):堿性提取液體積(mL) 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 堿性提取液),超聲波破碎(冰浴,功率20% 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 ),95℃水浴 5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min; 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。

充分混勻,靜置 5min ,20000g,25℃離心 5min,棄上清,沉淀中加入:

混勻, 200μL 轉(zhuǎn)移至微量石英比色皿或 96 孔板中,570nm 下讀取對照吸光值 A1 和測定管吸光值 A2,計(jì)算A=A2-A1

注意事項(xiàng):

1、如果一次性測定樣本數(shù)較多,可將試劑一、二、三和四按比例配成混合液。

2、對照管和測定管的測定步驟的區(qū)別:對照管加完試劑一、二、三、四和五后必須馬上加試劑六;測定管加完試劑一、二、三、四和五后必須反應(yīng) 20min 后再加試劑六。

3、反應(yīng)過程中注意避光。

4、若 NAD+測定中A(A2-A1)≤0.0302,NADH 測定中A(A2-A1)≤0.0222,說明樣本中輔酶含量較低,已低于檢測限,可做如下調(diào)整:(1)將測定管避光靜置時(shí)間 20min 延長到 60min;(2)在提取階段增加取樣量,即取 0.2g 樣本或 0.2mL 樣本加入 1mL 提取液。

5、由于每一個(gè)測定管需要設(shè)一個(gè)對照管,本試劑盒 100 管保證測 48 個(gè) NAD+ NADH.

NAD+ NADH 含量的計(jì)算:

() NAD+含量的計(jì)算

標(biāo)準(zhǔn)條件下的回歸曲線為 y = 0.1475x + 0.0302,R2 = 0.9978;其中 y A,x NAD+濃度 nmol/mL

1、血清(漿) NAD+含量計(jì)算

NAD+含量(nmol/mL)=[(A -0.0302)÷0.1475×V1) ]÷(V3×V1÷V2)=135.6×(A -0.0302)

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中 NAD+含量計(jì)算

(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算

NAD+(nmol/mg prot)=[(A -0.0302)÷0.1475×V1)]÷(V1×Cpr)= 6.8×(A -0.0302)÷Cpr

(2)按樣本鮮重計(jì)算

NAD+(nmol/g 鮮重)= [(A -0.0302)÷0.1475×V1)]÷(W×V1÷V2)= 13.6×(A -0.0302)÷W

(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算

NAD+(nmol/104 cell)=[(A -0.0302)÷0.1475×V1)]÷(500×V1÷V2)=0.027×(A -0.0302)

()NADH 含量的計(jì)算

標(biāo)準(zhǔn)條件下的回歸曲線為 y = 0.1404x + 0.0222,R2 = 0.9976;其中 y A,x NADH 濃度 nmol/mL

1、血清(漿) NADH 含量計(jì)算

NADH 含量(nmol/mL)= [ (A -0.0222)÷0.1404×V1) ]÷(V3×V1÷V2)= 142.5×(A -0.0222)

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中 NADH 含量計(jì)算

(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算

NADH (nmol/mg prot)= [ (A -0.0222)÷0.1404×V1) ]÷(V1×Cpr)= 7.1×(A -0.0222)÷Cpr

(2)按樣本鮮重計(jì)算

NADH (nmol/g 鮮重)=[(A -0.0222)÷0.1404×V1) ]÷(W×V1÷V2)= 14.2×(A -0.0222)÷W

(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算

NADH (nmol/104 cell)= [ (A -0.0222)÷0.1404×V1) ]÷(500×V1÷V2)=0.028×(A -0.0222)

V1:加入反應(yīng)體系中樣本體積,0.02mL;V2:加入提取液體積,2mL;V3:加入血清(漿)體積:0.1mL;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL; W:樣本質(zhì)量,g;500:細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù),500 萬。

: 檢測限為 0.1nmol/mL 0.1nmol/g 鮮重 0.001nmol/mg prot
















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