供貨周期 | 現貨 | 規格 | 50X100ul |
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貨號 | ABG711-50 | 應用領域 | 環保,食品,化工,生物產業,制藥 |
主要用途 | 感受態細胞 |
X33酵母感受態細胞操作說明:
1、取需轉化質粒5µg,酶切,回收;
2、取一支無菌的1.5ml EP管,依次加入預冷的線性質粒1-5µg(體積不高于15µl),酵母促轉化劑10µl,100µl冰上融化的感受態細胞,畢赤酵母轉化液500µl,輕輕翻轉混勻6-8次;
3、30℃水浴30min,每15min輕輕翻轉混勻6-8次;
4、每支加入20µl的二甲基亞砜;(用于提高轉化效率,也可不做)
5、42℃水浴15min,每7.5min輕輕翻轉混勻6-8次;
6、12000rpm瞬時離心棄上清,每支加1ml的YPGPlus(或YPG)于30℃復蘇1h;(用于提高轉化效率,也可不做)
7、12000rpm瞬時離心棄上清,用100µl 0.9%NaCl重懸,涂板,30℃培養3-7d。
X33酵母感受態細胞注意事項:
1、使用酵母促轉化劑前,請把裝有酵母促轉化劑的管子在沸水中煮沸5min,然后立即放在冰上,用后放在-20℃儲存備用。
2、轉化液低溫環境下會析出,請于常溫下溶解后使用。
3、轉化全程要無菌操作。