M2701 CCK-8細(xì)胞增殖和凋亡檢測(cè)試劑
參考價(jià) | ¥ 150 |
訂貨量 | ≥1件 |
- 公司名稱 上海雅吉生物科技有限公司
- 品牌 雅吉生物
- 型號(hào) M2701
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2024/11/1 18:29:18
- 訪問(wèn)次數(shù) 309
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100T/500T |
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貨號(hào) | M2701 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥,綜合 |
主要用途 | 科研實(shí)驗(yàn) |
CCK-8細(xì)胞增殖和凋亡檢測(cè)試劑增殖與毒性檢測(cè)試劑是一種基于WST-8的廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性檢測(cè)的試劑,因其操作簡(jiǎn)單快速、高靈敏度且細(xì)胞毒性低等成為替代MTT法檢測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)密度的最好方法。該試劑盒利用水溶性四唑鹽-WST?-8在電子載體1-Methoxy PMS存在的情況下能夠被還原成水溶性的甲臜染料,生成的甲臜量與活細(xì)胞數(shù)量成正比。細(xì)胞增殖越多越快,則顏色越深;細(xì)胞毒性越大,則顏色越淺。對(duì)于同樣的細(xì)胞,顏色的深淺和細(xì)胞數(shù)目呈線性關(guān)系。
優(yōu)勢(shì)
靈敏度高,數(shù)據(jù)重復(fù)性好
操作簡(jiǎn)單,安全性高
細(xì)胞毒性低,無(wú)需放射性同位素
單一組分,無(wú)需配制
應(yīng)用
細(xì)胞增殖測(cè)定、細(xì)胞毒性測(cè)定、藥物篩選、腫瘤藥敏試驗(yàn)
儲(chǔ)存
-20℃避光可保存2年,融化后 4℃避光放置可保存 1 年。反復(fù)凍融會(huì)增加背景值。
注意事項(xiàng)
1. 接種時(shí)注意細(xì)胞懸液一定要混勻,以避免細(xì)胞沉淀下來(lái),導(dǎo)致每孔中的細(xì)胞數(shù)量不等,可以每接種幾個(gè)孔就混勻一下。培養(yǎng)板周圍一圈孔培養(yǎng)基容易揮發(fā),為了減少誤差,建議培養(yǎng)板的四邊每孔只加培養(yǎng)基或PBS,而不作為指標(biāo)檢測(cè)孔。
2. 本試劑盒的檢測(cè)依賴于脫氫酶催化的反應(yīng),如果待檢測(cè)體系中存在較多的還原劑,例如一些抗氧化劑會(huì)干擾檢測(cè),需設(shè)法去除。
3. 用酶標(biāo)儀檢測(cè)前需確保每個(gè)孔內(nèi)沒(méi)有氣泡,否則會(huì)干擾測(cè)定。
4. 培養(yǎng)時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類的不同和每孔內(nèi)細(xì)胞數(shù)量的多少而異。一般情況下,白細(xì)胞較難染色,因此需要較長(zhǎng)的培養(yǎng)時(shí)間或增加細(xì)胞數(shù)量 (~105個(gè)細(xì)胞/孔)。懸浮細(xì)胞與貼壁細(xì)胞相比較難染色。對(duì)于懸浮細(xì)胞,在培養(yǎng)1- 4小時(shí)后,可先從培養(yǎng)箱中取出,目察染色程度或用酶標(biāo)儀測(cè)定決定。若染色困難,可將培養(yǎng)板放回培養(yǎng)箱,繼續(xù)培養(yǎng)數(shù)小時(shí)后再確定。 染色的最佳時(shí)間可定為懸浮細(xì)胞的最佳培養(yǎng)時(shí)間。對(duì)于貼壁細(xì)胞,培養(yǎng)時(shí)間一般為1-4小時(shí),但在培養(yǎng)30分鐘左右即可取出肉眼觀察染色程度 (根據(jù)細(xì)胞種類而定,需要摸索一下條件)。
5. 若細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng),培養(yǎng)基顏色發(fā)生變化或 pH發(fā)生變化,建議更換新鮮的培養(yǎng)基后再加CCK-8試劑。
CCK-8細(xì)胞增殖和凋亡檢測(cè)試劑恒溫?cái)U(kuò)增使用策略及實(shí)例展示
應(yīng)用實(shí)例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測(cè)試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標(biāo)準(zhǔn)定量PCR儀或恒溫?zé)晒鈨x上進(jìn)行反應(yīng)。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)25min的檢測(cè)結(jié)果,可以看到檢測(cè)反應(yīng)<20min(達(dá)平臺(tái)期)。
應(yīng)用實(shí)例2: 用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測(cè)試。OG變色法為終點(diǎn)變色策略,在反應(yīng)結(jié)束后,倒置反應(yīng)管,溶解管蓋上染料后,陽(yáng)性樣本呈現(xiàn)出醒目的綠色,陰性表現(xiàn)出橙色,區(qū)分明顯。且該方法不受樣本類型限制,雜質(zhì)耐受性很好。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)20min后檢測(cè)結(jié)果。
應(yīng)用實(shí)例3:A3825-01 紅黃變色反應(yīng)(肉眼觀察)
以 體外轉(zhuǎn)錄 RNA 為模板,1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結(jié)束反應(yīng)起
始前,下圖為 65 度反應(yīng) 30min 后。
雅吉生物是一家生物企業(yè)主營(yíng)ATCC細(xì)胞,細(xì)胞系,原代細(xì)胞和培養(yǎng)試劑,重組蛋白,ELISA試劑盒、抗體、熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒更多產(chǎn)品歡迎咨詢。