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化工儀器網>產品展廳>試劑標物>行業專用試劑>生化與分子生物學用試劑>IM-C049 豬肝星狀細胞(永生化)

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IM-C049 豬肝星狀細胞(永生化)

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  南京賽泓瑞生物科技有限公司專注于是一家專注于研發和生產原代細胞、腫瘤細胞及細胞培養相關試劑產品的生物高科技企業,可以為各類研究機構提供符合標準規范的原代細胞、腫瘤細胞及相關實驗技術服務;

   南京賽泓瑞生物科技有限公司有一支由中國藥科大學和南京醫科大學多名博士組成的研發團隊,致力于為您的細胞研究及細胞培養實驗提供高品質、穩定性良好的產品,做“您身邊的細胞培養專家”。細胞培養提供全程服務,產品涵蓋原代細胞、細胞系、免疫細胞及干細胞、胎牛血清、無血清非程序凍存液、培養基、基礎培養基、“支原體”、“黑膠蟲”清除試劑、細胞因子、胰酶、雙抗等細胞培養及實驗相關產品。

  公司設立質量管理部,建立了高標準的質檢系統,產品從原料、半成品、成品入庫到銷售之前,每一個環節都有嚴格的質檢標準,并以標準的生產工藝,保證產品質量的穩定性。



胎牛血清,原代細胞,耐藥細胞,標記細胞,LUC標記細胞,培養基

一、細胞基本屬性
細胞名稱豬肝星狀細胞(永生化)
種屬來源
組織來源實驗動物正常肝組織
生長特性貼壁生長
細胞形態長梭狀不規則細胞
背景簡介

肝星狀細胞是細胞外基質的主要來源,正常情況下肝星狀細胞處于靜止狀態。當肝臟受到炎癥或機械刺激等損傷時,肝星狀細胞被激活,其表型由靜止型轉變為激活型,肝星狀細胞激活并轉化為肌成纖維細胞樣細胞,各種致纖維化因素均把HSC作為最終靶細胞。激活的肝星狀細胞一方面通過增生和分泌細胞外基質參與肝纖維化的形成和肝內結構的重建,另一方面通過細胞收縮使肝竇內壓升高。

該細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶SV40基因。


細胞代數10代以內
細胞規格1×106cells/T25培養瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性
培養基豬肝星狀細胞培養基
培養條件氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
凍存條件無血清凍存液,液氮儲存
特征特性結蛋白(Desmin)或者平滑肌肌動蛋白(α-SMA)免疫熒光染色為陽性,經鑒定細胞純度高于90%
細胞貨期2周左右
運輸方式復蘇發貨(T25瓶免運輸費用)/凍存發貨(需加干冰運輸費用) 順豐快遞
供應限制于科學研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用
特別說明以下細胞培養凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產品說明書為主
二、細胞培養操作
收貨方式T25瓶凍存管
收貨處理觀察好細胞狀態后,75%酒精消毒瓶壁,將T25瓶置于37度培養箱放置2-4h,以便穩定細胞狀態收到細胞后,需立即轉入液氮凍存或直接復蘇
傳代密度細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養第三天換液并檢查細胞密度
傳代比例傳代建議1:2傳代
1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
一管細胞建議接種到10cm培養皿或者T25瓶
傳代方法a、棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,使消化液浸潤所有細胞,將培養瓶置于37℃培養箱中消化1-2 min(視細胞情況而定),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加2-3ml培養基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養液后吹勻。
c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養基的新皿中或者瓶中,置于培養箱中培養。
將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養基的培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10 cm皿中,加入約8 mL培養基,培養過夜)。第三天換液并檢查細胞密度。
注意事項
1.運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的培養基來培養細胞。
2.因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F象。
1.收貨時若發現干冰化完,檢查凍存管是否融化,若已融化需直接離心細胞接種觀察,若未融化可以將細胞按正常步驟保存;
2.為保證細胞的高存活率,收到產品后,請立即解凍復蘇細胞。
到貨須知
1.收到細胞后,首先觀察并拍照記錄細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,干冰運輸的細胞檢查干冰是否揮發,細胞是否解凍,若有上述現象發生請及時和我們聯系。
2.靜置完成后,取出細胞培養瓶,鏡檢、拍照(當天以及第 2,3 天請拍照),記錄細胞狀態 (所拍照片將作為后續服務依據);建議細胞傳代培養后,定期拍照、記錄細胞生長狀態。
3.由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
4.仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養條件一致,若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題,責任由客戶自行承擔。
備注:客戶在細胞培養過程中,有任何技術問題可以技術服務電話: 按 2,我們隨時給予解答。
三、細胞凍存操作
凍存液配方無血清凍存液,液氮儲存
細胞密度待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例
凍存方法a、收集細胞及細胞培養液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進行細胞計數。
b、根據細胞數量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度5x106~1x107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
注意事項凍存細胞轉入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性,若有異常,及時調整實驗方案
四、售后服務
重發標準
1.細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、瓶身破損、培養液嚴重漏液等,重發;
2.收到細胞未開封,如出現污染狀況,重發;
3.收到細胞3天內,發現污染問題,經核實后,重發;
4.常溫發貨的細胞靜置 2 小時后,干冰凍存發貨的細胞復蘇 2 天后,絕大多數細胞未存活,經核實后,重發;
5.常溫發貨的細胞靜置 22 小時并且未開封或干冰凍存發貨的細胞復蘇 2 天后,出現污染,經核實后,重發;
6.細胞活性問題,請在收到產品 3 天內給我們提出真實的實驗結果,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,經核實后,重發;
7.視具體情況而定。
不予重發
1.客戶操作造成細胞污染,不重發;
2.客戶嚴重操作失誤致細胞狀態不好,不重發;
3.非我們推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好,不重發;
4.細胞狀態不好,未提供真實清晰的培養前 3 天的細胞狀態照片,不重發;
5.細胞培養時經其它處理導致細胞出現問題的,不重發;
6.收到細胞發現問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的,不重發;
7.視具體情況而定。


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