裸鼠乳腺癌原位瘤
1、人乳腺癌細胞株的選擇
目前人乳腺癌細胞建株的癌細胞較多,本人曾接觸過細胞株總結如下:
ER(+):MCF-7(來源:乳腺腺癌),ZR-75-30(乳腺導管癌),T47D(乳腺導管癌),ZR-75(乳腺腺癌)。
ER(-):MDA-MB-435s(乳腺導管癌),MDA-MB-435(乳腺導管癌),SK-BR-3 (乳腺腺癌),MDA-MB-231 (乳腺腺癌),MDA-MB-453(乳腺腺癌)。
作為乳腺癌細胞移植裸鼠的選擇,本人推薦:ER(+)選用MCF-7和ZR-75-30;ER(—)選用MDA-MB-435s和MDAMB-231。這幾株細胞成瘤率較高。
2、提高移植成功率
①將HBC細胞植入裸鼠的乳房脂肪墊(Mammary fad pat,mfp),又稱原位移植(相反則稱異位移植),不僅可以提高乳腺癌細胞的成瘤率而且可以增加轉移的發生率。
②促進腫瘤細胞在裸鼠體內形成腫瘤的方法是將癌細胞和Matrigel或成纖維細胞混合后注入裸鼠體內。Matrigel是由層粘連蛋白、Ⅳ型膠原纖維、硫酸乙酰肝素和巢蛋白組成的混合物,在4℃為液體,而在37℃則聚合形成一種凝膠。
③裸鼠的選擇
Balb/c、 nu/nu雌性裸鼠 (SPF級),4-6周齡,體重18-22g,預實驗選用Balb/c小鼠,用于mfp的解剖。
3、材料
常規器械:15號小圓刀、小刀柄、1ml,5ml空針、橡筋、定鼠板、釘子、zhi血鉗、眼科剪、口罩帽子手套;
藥品準備:安氟醚、NS、酒精、脫毛劑(硫化)、腎shang腺素;
顯微外科器械:8倍目視顯微鏡或16倍臺式顯微鏡、顯微手shu器械(組織jian、持針器、鑷子)、50ul微量注射器(檢驗系用);
小鼠解剖準備:BALB/C小鼠(清潔級);
飼養條件準備:鼠籠、飼料、水杯;
脫毛劑配方:硫化鹼10g、生石灰15g、40%酒精100ml。
操作注意事項:
①特別注意:進針后準確、緩慢注入裸鼠乳腺脂肪墊內,萬不可讓細胞溢出脂肪墊;
②注射劑量、進針深度、角度、注射器推進速度;
③對注射癌細胞后的裸鼠當病人認真對待,認真做好病程記錄:生命體征、體重、活動度、食量、飲水量等。
收費標準/服務周期/提供結果:
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