心肌梗死動物模型心腦血管模型
造模機制
通過結扎引起模型動物的冠狀動脈狹窄或閉塞,使該冠脈所供應的心肌缺血、壞死,從而引起模型動物心肌梗死。
造模方法
簡要的來說,一般冠狀動脈結扎術主要分為三步:
1、首先,動物在麻醉后,在第四肋間行左胸開胸術;
2、然后小心地將心bao膜打開,在左心耳尖遠端結扎左冠狀動脈前降支(left anterior descending,LAD),如 果結扎成功的話。心電圖(electrocardiogram,ECG)則顯示典型的ST段抬高,而觀察左心室前壁也會變白;
3、最后關閉胸腔。如需制作心肌缺血再灌注損傷模型,可在結扎LAD后30分鐘再去除結扎,引起缺血再灌注損壞。
具體造模方法以下列幾個動物為例:
豬:
1、選用18~22kg小型豬,先應用30g/L戊巴bi妥在豬耳緣靜脈推注3~5ml使豬鎮(zhèn)靜,3~5分鐘后豬站立不穩(wěn)而臥倒。
2、然后迅速用tao管針在豬耳緣靜脈建立靜脈通路,并緩慢推注30g/L戊巴bi妥(1ml/kg)麻醉后,將動物取仰臥位置于介入室手shu臺。
3、分離暴露氣管,氣管cha管。連接呼吸ji。沿胸骨第四肋間開胸,暴露心臟,提起心包縱向切開并做心包床。
4、離LAD主干中下1/3交界處,并在其下穿根絲線備用于結扎。
5、將4個多點固定式心外膜電極襯片縫在心臟表面,多導生理記錄yi描記結扎前、結扎后心外膜電圖,以ST段升高為造模成功標準。
6、關閉胸腔,撤出呼xi機。
犬:
1、一般選用比格犬,體重10~18kg,動物稱重后以3%戊巴bi妥鈉30mg/kg靜脈注射麻醉,右側位固定于手shu臺。
2、氣管cha管,連接呼xi機。
3、一般選用比格犬,體重10~18kg,動物稱重后以3%戊巴bi妥鈉30mq/kg靜脈注射麻醉,右側位固定于手shu臺。
4、氣管cha管,連接呼xi機。
5、沿胸骨左緣第4或第5肋間開胸,暴露心臟,剪開心包并做心包床,
6、分離LAD主干中下1/3交界處,并在其下穿根絲線備用于結扎。
7,在心臟表面縫上多點固定式心外膜電極襯片,多導生理ji錄儀描記結扎前,結扎后心外膜電圖,以ST段升高為造模成功標準。
8、關閉胸腔,撤出呼xi機,按需要處理動物。
大鼠:
1、選用成年Wistar大鼠,體重250g左右,39/L戊巴bi妥鈉10ml/kg進行腹腔注射,插管前給予atropine 20 ~30μg/kg腹腔注射。
2、先行氣管cha管,連接呼xi機;大鼠仰臥位四肢固定好,去毛,上界為胸骨上緣水平,下界為胸骨下緣水平。
、消毒鋪單后,以心尖搏動zui強點為中心,沿胸骨左緣3mm左右作一約1.5~2.0cm長縱形切口,逐層開胸進入胸腔。
4、剪開心bao膜,暴露左心耳,從左心耳下方2~3mm入針,結扎的中點在左心耳和肺動脈圓錐的交界上。
5、結扎方向與左心耳邊緣平行,而且與房室交界線垂直。
6、進針深度1.5~2.0mm,由于大鼠冠狀動脈細小不易于心肌分離,通常用縫合線連同部分心肌一起結扎,結扎的力度適中以防止損傷心肌或血管。
7、把心臟放回胸腔,迅速縫合胸壁。停止人工呼吸。 造模成功的標志是心壁的顏色變白和心電圖監(jiān)測ST段抬高。
小鼠:
1、選用25~30g小鼠。腹腔內注射戊巴bi妥鈉(50mg/kg)。
2、待小鼠麻醉后將其用膠布固定于操作板上。剃凈胸部毛發(fā),70%乙醇消毒,在直視下將22G套管zhen送入氣管,重建氣道,呼吸頻率設置于100~110次/min。
3、取左側胸骨正中線,垂直肋骨,剪開皮膚。
4、逐層分離胸大肌、胸小肌,在小鼠的呼氣相分別剪斷第三、四、五肋骨,使用開胸器將胸骨撐開、固定,暴露心臟,剪開心bao膜。
5、在顯微鏡下尋找左前降支,在左房下緣1mm左右、跨度1mm左右以10.0的眼科縫he線結扎左前降支。
6、觀察心電圖ST-T改變及心肌顏色變化。
7、拆除開胸器,以8-0的wu創(chuàng)縫合線關閉胸腔。
8、縫合皮膚,術后維持呼xi機約30分鐘,待小鼠清醒后撤機。
需確認的信息
1. 模型種屬(大鼠還是小鼠或是其他種屬)
2. 動物體重有無要求,年齡有無要求
3. 雌雄有無要求
4. 模型構建具體方案
5. 取材要求(采血、取組織樣本)
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