腦缺血及再灌注模型動物實驗
腦缺血在臨床上具有較高的發病率和死亡率,嚴重危害中老年患者健康,尋找有明確療效且作用機制清晰 的預防和治療腦梗死的藥物是當前研究的前沿課題和熱點領域。因此,腦缺血動物模型的制備在科學研究中具有重要意義。
MCAO 模型制備:
術前準備見左圖,選擇 220-250g 的 SD 大鼠,10% 水he氯醛(300uL/100g)麻醉保定,仰臥位,頸部正中剃毛消毒備用
剪開頸部皮膚,鈍性分離頸部肌肉,暴露并游離單側頸動脈,穿線備用
動脈jia暫時夾閉主動脈,并結扎頸外動脈。主動脈用注射器針頭挑開小口,插入自制線栓到頸內動脈,大約 2.5-3cm。結扎頸內動脈,結扎主動脈近心端,松開動mai夾。
逐層縫合,根據實驗的需要的缺血時間進行拔栓手術(再灌注),拔栓時動物要完quan麻醉,把出線栓的長度約為 0.5cm。
模型成功的評判方法
神經功能缺損(NDS)評分
0 分:活動基本正常,無明顯神經bing學癥狀;
1 分:左側前爪無法完quan伸展;
2 分:爬行時向左側轉圈;
3 分:行走時向偏癱側傾倒;
4 分:不能自動行走,有意識障礙
5 分:死亡
水迷宮實驗 Morris 水迷宮(Morris water maze, MWM)實驗是一種強迫實驗動物(大鼠、小鼠)游泳,學習尋找 隱藏在水中平臺的一種實驗,主要用于測試實驗動物對空間位置感和方向感(空間定位)的學習記憶能力。(左圖正常,右圖模型)
TTC 染色 TTC 染色是常用來評價腦缺血損傷的指標,缺血區域會呈白色。
HE 染色 一般發生缺血損傷的腦組織的神經元細胞會受到明顯損傷(上側正常,下側損傷)
TUNEL 染色發生損傷的腦組織,TUNEL 染色的細胞會明顯增多。
腦缺血及再灌注模型動物實驗