慢性心力衰竭動(dòng)物模型  心腦血管模型

基本原理

高血壓和心室血液流出道受阻是造成心臟壓力超負(fù)荷的常見(jiàn)原因，如主動(dòng)脈、肺動(dòng)脈縮窄或半月瓣狹窄均可加重心臟后負(fù)荷。心臟壓力超負(fù)荷心衰模型形成的主要途徑是用線或特制的動(dòng)脈jia縮窄大血管口徑，因此，建立該模型的關(guān)鍵在于控制血管縮窄程度。嚴(yán)重縮窄可造成急性心力衰竭，中度縮窄時(shí)首先出現(xiàn)心肌肥大，隨著肥大心肌轉(zhuǎn)變?yōu)樗ソ咝募《霈F(xiàn)慢性心力衰竭。

造模機(jī)制

主動(dòng)脈狹窄造成左室血液流出道受阻，左室后負(fù)荷加重，心臟的代償機(jī)制導(dǎo)致心肌肥厚，部分動(dòng)物發(fā)展成心衰或肺部動(dòng)脈狹窄，使右心室排血受阻，右心室負(fù)荷增加，體循環(huán)回心血液不能完quan進(jìn)入肺循環(huán)時(shí)，出現(xiàn)右心衰竭，發(fā)生內(nèi)臟器官充血和全身水腫等癥狀，造成慢性心力衰竭模型。主動(dòng)脈縮窄部位多在腎動(dòng)脈分支上方，也可縮窄胸主動(dòng)脈。也可在結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈前降支的基礎(chǔ)上逐漸縮窄升主動(dòng)脈產(chǎn)生類似冠心病伴高血壓所致的心衰。

造模方法

(1) 大鼠：

1、選用雌性Wistar大鼠，體重128～148g，肌注atropine 1mg/kg，用戊巴bi妥鈉50mg/kg腹腔麻醉后，行氣管cha管，取右胸前外切口開(kāi)胸，暴露升主動(dòng)脈。

2、根據(jù)升主動(dòng)脈直徑，用穿有4號(hào)絲線的無(wú)菌塑料軟管(直徑1mm，長(zhǎng)度6～8mm)，在主動(dòng)脈上方1cm 處，對(duì)升主動(dòng)脈進(jìn)行縮窄，縮窄環(huán)直徑與主動(dòng)脈直徑相一致，由于用帶套管絲線縮窄升主動(dòng)脈，使縮窄口徑大小可控制。

3、對(duì)幼年Wistar大鼠升主動(dòng)脈慢性縮窄，在術(shù)后3～5個(gè)月可產(chǎn)生穩(wěn)定的后負(fù)荷心衰。

4、也可以采取縮窄腹主動(dòng)脈的方法造模，在雄性Sprague Dawley大鼠左腎動(dòng)脈分支近端0.5cm處，用9號(hào)針頭與腹主動(dòng)脈共同結(jié)扎，取出針頭后，造成約50％的環(huán)狀狹窄，術(shù)后喂養(yǎng)8周致CHF大鼠模型。

5、或在雄性Wistar大鼠雙腎動(dòng)脈上方分離腹主動(dòng)脈，用內(nèi)徑0.7mm的銀jia造成腹主動(dòng)脈狹窄。

(2)家兔:

1、選用體重30kg以上的健康家兔，用2.5%硫噴妥鈉20mg/kg靜脈麻醉或1%普魯卡因局部麻醉，仰位固定，左側(cè)頸總動(dòng)脈插管車左門室，并保留插管臨測(cè)血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)

2、在無(wú)菌條件下，自劍突下2cm處，沿腹部正中線縱行切開(kāi)一長(zhǎng)約6～8cm切口，逐層剪開(kāi)皮下組織、肌肉和腹膜，進(jìn)入腹腔后將腸管沿腸系膜方向推向左下腹并以生理鹽水紗布包裹，暴露手術(shù)野，在腎動(dòng)脈分支稍上處找到腹主動(dòng)脈并分離此動(dòng)脈，在游離腹主動(dòng)脈處用線結(jié)扎或放置一個(gè)特制動(dòng)脈jia如Goldblatt夾。

3、或用游標(biāo)卡尺精確測(cè)量動(dòng)脈外徑后，選擇合適粗細(xì)的穿刺針緊貼于動(dòng)脈壁作為控制縮窄程度的模板， 用4號(hào)絲線將穿刺針和動(dòng)脈共同結(jié)扎，然后抽出穿刺針使腹主動(dòng)脈縮窄，縮窄面積為原腹主動(dòng)脈面積的 25％，關(guān)閉腹腔。術(shù)后給予青霉su肌注防止感染，并給0.9％生理鹽水65ml維持體內(nèi)鈉離子平衡。

4、術(shù)后每天監(jiān)測(cè)血壓、心率、LVP(左心室壓力)、 LVEDP(左室舒張末期壓)、dp/dtmax(左室等容期壓力 zui大變化速率)等指標(biāo)。

5、2～12天后血壓和左室舒張壓末期壓進(jìn)行性升高、dp/dtmax降低。

6、尸體解剖見(jiàn)胸腔積液、腹水、肺充血水腫、肝充血、左右室明顯擴(kuò)大性肥厚。

觀測(cè)指標(biāo)

模型組毛色蓬松、干燥無(wú)光澤，呼吸頻率加快，心肌細(xì)胞體積增大、數(shù)量減少、排列紊亂；病理變化明顯，如心肌間質(zhì)膠原纖維增多，血管周圍細(xì)胞外基質(zhì)增多等。

部分結(jié)果展示 IHC（x200）

 正常組                對(duì)照組

模型特點(diǎn)

此模型成功率高，比較容易發(fā)生心力衰竭，操作方便、重復(fù)性好、造價(jià)低、創(chuàng)傷較小、手術(shù)時(shí)間短。但狹 窄程度難以掌握，需經(jīng)過(guò)摸索，不可狹窄或過(guò)松，過(guò)松不易形成心衰，過(guò)緊則死亡率高。腹主動(dòng)脈縮窄模型需時(shí)較長(zhǎng)，有時(shí)不易產(chǎn)生心力衰竭。

持續(xù)恒速靜注WU頭堿誘發(fā)大白鼠的心律失常

實(shí)驗(yàn)材料： 1.動(dòng)物：家兔、大白鼠或小白鼠

2.試劑和器材：3%戊B比妥鈉或20%烏拉坦，0 .05%WU頭堿

復(fù)制方法：

1、動(dòng)物麻醉、記錄標(biāo)準(zhǔn)肢體Ⅱ?qū)?lián)心電圖正常后，舌下靜脈以0.1ml/min的速度恒速給含5 μg/kgWU頭堿的溶液，記錄出現(xiàn)室性早搏、室性心動(dòng)過(guò)速、心室纖顫和心跳停止的時(shí)間并計(jì)算WU頭堿的用量。 2、實(shí)驗(yàn)組預(yù)先給藥。比較對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)給藥組出現(xiàn)不同心律失常的時(shí)間，以及WU頭堿用量。

3、也可一次靜脈注射WU頭堿誘發(fā)心律失常，通常家兔給100～150μg/kg;大白鼠給30～50 μg/kg，當(dāng)心律失常形成10min后（穩(wěn)定后），對(duì)照組給生理鹽水，實(shí)驗(yàn)組給藥物，觀察心電圖的變化直至恢復(fù)竇性節(jié)律，一般連續(xù)20min維持竇性心律者為完quan恢復(fù)。 記錄心律失常出現(xiàn)的時(shí)間和持續(xù)時(shí)間。

注意事項(xiàng)： 靜脈注射WU頭堿的速度不同，形成心律失常的速度及持續(xù)時(shí)間也不完quan相同，慢速注射（1～5 min注 完），所用劑量偏下限，一般心律失常約3～10min出現(xiàn)，持續(xù)90～120min；快速注射（3～5 s 注射 完），所用劑量偏上限，通常心律失常約持續(xù)45～80 min。麻醉開(kāi)胸動(dòng)物局部應(yīng)用WU頭堿誘發(fā)心律失常法

實(shí)驗(yàn)材料：

1.動(dòng)物：犬、貓或家兔

2.試劑和器材：3%戊B比妥鈉或20%烏拉坦，0.05% WU頭堿

復(fù)制方法：

動(dòng)物用戊B比妥鈉或?yàn)趵孤樽恚_(kāi)胸后給人工呼吸，打開(kāi)心包，將0.05% WU頭堿溶液0.05ml浸透的棉球放臵在右心房上，可引起房性心動(dòng)過(guò)速，持續(xù)1h或更長(zhǎng)。

記錄心律失常持續(xù)時(shí)間，與給藥組對(duì)比以確定藥物是否有效。若將WU頭堿注入心房壁內(nèi)或竇房結(jié)區(qū)的壁內(nèi)可誘發(fā)房性心動(dòng)過(guò)速或房顫。

氯化鈣誘發(fā)心律失常

實(shí)驗(yàn)材料：

1.動(dòng)物：大白鼠

2.試劑和器材：20%烏拉坦，

3.5 %氯化鈣，受試藥品

復(fù)制方法：

大白鼠稱重、烏拉坦麻醉后固定，隨機(jī)分為對(duì)照組、給藥組。先預(yù)防性給藥，然后快速推注3.5 %氯化鈣(140 mg/kg)，10s 內(nèi)推完，記錄心電圖II導(dǎo)聯(lián)，觀察其心律失常情況，實(shí)驗(yàn)結(jié)果以死亡或存活做指標(biāo)統(tǒng)計(jì)其保護(hù)率。
注意事項(xiàng):
此模型僅用于預(yù)防給藥;統(tǒng)計(jì)學(xué)用兩率的對(duì)比，心房局部應(yīng)用ACh誘發(fā)房顫法。
需確認(rèn)的信息
1.模型種屬(大鼠還是小鼠或是其他種屬)
2.動(dòng)物體重有無(wú)要求，年齡有無(wú)要求
3.惟雄有無(wú)要求
4.模型構(gòu)建具體方案
5.取材要求(采血、取組織樣本) 

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