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Biolife CS10 細(xì)胞凍存液

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細(xì)胞凍存液

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普邁精醫(yī)科技(北京)有限公司(PRECISION MEDICINE TECHNOLOGY(Beijing)Co.LTDEVOQUA德國懿華在中國的合作伙伴,為實(shí)驗(yàn)室客戶提供專業(yè)的科研檢測設(shè)備解決方案。

我們了解科學(xué)儀器在全球的應(yīng)用,匯集于專業(yè)的解決方案,傳遞給國內(nèi)頂級科研及檢測人員,輔助我們的客戶取得事業(yè)進(jìn)步和成功。

我們提供的專業(yè)解決方案有:

實(shí)驗(yàn)室純水及超純水供給解決方案:可根據(jù)客戶需求,提供1.2-14/分鐘的超純水,10-1000/小時(shí)的純水設(shè)備及設(shè)計(jì)方案,并提供全部相關(guān)耗材,EDI去離子模塊。

生物樣本庫解決方案:樣本庫前期設(shè)計(jì)、各功能區(qū)規(guī)劃到樣本前后處理設(shè)備、樣本凍存耗材、樣本凍存設(shè)備,再到樣本自動化工作站、自動化樣本庫、樣本庫管理軟件,為客戶提供一站式樣本存儲解決方案。

細(xì)胞培養(yǎng)解決方案:該方案涵蓋組織提取,研磨消解,培養(yǎng)分選,生化分析,分離富集,凍存轉(zhuǎn)運(yùn)各環(huán)節(jié)的儀器設(shè)備及耗材,并提供相關(guān)檢測服務(wù)及科研服務(wù)。

細(xì)胞囊泡及外泌體EXOSOME解決方案:該方案涵蓋細(xì)胞囊泡及外泌體EXOSOME的分離提取,鑒定鑒別,測序分析及后續(xù)應(yīng)用。我們?yōu)榭蛻籼峁┫嚓P(guān)環(huán)節(jié)專業(yè)儀器,試劑盒,耗材,并提供相關(guān)檢測服務(wù)及科研服務(wù)。

分子生物學(xué)解決方案:該方案包含基因表達(dá),分子克隆,蛋白表達(dá),核酸檢測等各分子生物學(xué)研究領(lǐng)域所需要的設(shè)備及耗材,并提供流程自動化方案和技術(shù)服務(wù)。

醫(yī)療科研解決方案:普邁精醫(yī)針對醫(yī)療科研行業(yè),根據(jù)醫(yī)療科研人員的實(shí)際需求,整合以上多個(gè)解決方案,并和眾多優(yōu)秀廠家合作,開發(fā)傳統(tǒng)科學(xué)儀器在醫(yī)療上的創(chuàng)新型應(yīng)用,為客戶提供多方位的醫(yī)療科研和醫(yī)療檢驗(yàn)儀器,耗材,技術(shù)服務(wù)保障。

 

 

 

 

 

 

 

通用實(shí)驗(yàn)室設(shè)備,分子生物學(xué)設(shè)備,顯微鏡,成像設(shè)備,科研用耗材

供貨周期 一個(gè)月以上 規(guī)格 100ml
貨號 Biolife CS10 主要用途 培養(yǎng)基

Biolife CS10細(xì)胞凍存液

美國Biolife品牌CryoStor臨床級即用型凍存液產(chǎn)品都預(yù)先配制了USP級DMSO,這是一種滲透性冷凍保護(hù)劑,有助于減輕冰的形成造成的損害。在廣泛的細(xì)胞類型中,CryoStor配方已被證明比商業(yè)和家庭釀造的等滲和細(xì)胞外配方更有效地減少保存后的凋亡和壞死。CryoStor產(chǎn)品符合 USP<71>無菌和 USP<85>內(nèi)毒素檢測標(biāo)準(zhǔn),并按cGMP生產(chǎn)。CryoStor CS10預(yù)先配制了10%的DMSO,在冷凍、儲存和解凍過程中為需要10% DMSO的細(xì)胞和組織提供了安全、保護(hù)的環(huán)境。通過調(diào)節(jié)對低溫保存過程的分子生物學(xué)反應(yīng),CryoStor提供了增強(qiáng)的細(xì)胞活力和功能,同時(shí)消除了血清、蛋白質(zhì)或高水平的細(xì)胞毒性制劑的需求。

產(chǎn)品特點(diǎn):

• 單獨(dú)的Biolife品牌標(biāo)簽

• 預(yù)配置(10%DMSO)

• 無血清

• 無蛋白

• USP級別/高質(zhì)量組分

• cGMP 制造

• FDA 藥物主文件備案

• 無菌、內(nèi)毒素,以及細(xì)胞放行測試


產(chǎn)品規(guī)格:



產(chǎn)品參數(shù):

Jurkat T細(xì)胞微球懸浮在的低溫培養(yǎng)基中,然后放置在2 ml 凍存管中,并在2-8℃下孵育15分鐘。然后將cryovials轉(zhuǎn)移到無LN2-程序降溫儀以-1℃/分鐘的速度冷凍保存。在達(dá)到-70℃后,將樣品轉(zhuǎn)移到LN2儲存至少24小時(shí)。樣品在條件下解凍,用CGM(1:10稀釋)重懸,在37℃和5% CO2下轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱。在NucleoCounter NC-3000成像細(xì)胞儀(ChemoMetec,丹麥)上使用Via-1盒,根據(jù)膜完整性評估立即和解凍后24小時(shí)內(nèi)的細(xì)胞存活率和計(jì)數(shù)。

圖1-Jurkat T細(xì)胞的活力是基于在解凍后24小時(shí)內(nèi)使用膜完整性測定進(jìn)行評估。


圖2-使用膜完整性試驗(yàn)評估了解凍后Jurkat T細(xì)胞的可見復(fù)蘇率和擴(kuò)增性能。


結(jié)論:

1-解凍后立即對細(xì)胞活率和數(shù)量進(jìn)行分析并不能反映冷凍保存過程成功與否。未優(yōu)化的冷凍培養(yǎng)基的不良影響可能要到解凍后的24-48小時(shí)才能檢測到,這歸因于低溫保存誘導(dǎo)的延遲性細(xì)胞死亡(DOCD)。另一方面,優(yōu)化的低溫保存介質(zhì)的加入可以防止DOCD的發(fā)生;因此,減少了變異性,更準(zhǔn)確地估計(jì)了解凍后的生存和增殖。

2-低溫貯藏前的補(bǔ)料時(shí)間和培養(yǎng)基的變化對低溫貯藏過程的結(jié)果有重要影響。這可能是由于一些參數(shù),包括在冷凍前活力試驗(yàn)中沒有出現(xiàn)的壓力積累,但與DOCS結(jié)合,導(dǎo)致解凍后活力和功能的顯著損失。

3-冰成核的隨機(jī)性本質(zhì)上導(dǎo)致了細(xì)胞在低溫保存過程中所承受的低溫保存誘導(dǎo)應(yīng)力的變化。因此適當(dāng)?shù)某珊藢δP蚑細(xì)胞的生存能力和增殖能力有顯著影響。

4-在37°C介質(zhì)中稀釋(類似于患者給藥情景)是解凍后的最佳稀釋實(shí)踐。強(qiáng)烈建議,為了分析目的,細(xì)胞也應(yīng)在溫暖介質(zhì)中稀釋,以盡量減少在洗滌過程中滲透細(xì)胞的腫脹和溶解。


使用方法:

1. 將待冷凍保存的細(xì)胞重懸置于懸浮液中(機(jī)械或酶法解離)

2. 對細(xì)胞進(jìn)行離心

3. 去除上清液-注意:盡可能多地去除培養(yǎng)基,以減少冷凍液的稀釋。

4. 添加冷(2°-8°C) 的cryostor凍存液。細(xì)胞濃度按照常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)方案0.5-10*106細(xì)胞/mL(可能更高)。DMSO是預(yù)先混合在cryostor凍存液中且凍存液中不含添加劑。

5-預(yù)冷凍:細(xì)胞懸液在2°-8°C下孵育約10分鐘。

6-冷凍成核:在-80°C冷凍樣品(許多protocol推薦交替使用-70°C和-80°C環(huán)境來處理樣本)。對大多數(shù)哺乳動物細(xì)胞系統(tǒng)推薦使用程序降溫儀來控制速率冷凍(-1°C/min),如果使用冷凍裝置或異丙醇容器則應(yīng)提前容器預(yù)冷至2°-8°c,使用異丙醇容器的冷凍時(shí)間(-80°C)建議約為4小時(shí),或不超過一夜。樣品內(nèi)的冰成核應(yīng)在大約-5°C下開始,使用可控速率冷凍機(jī)上的液氮爆裂程序設(shè)置,或在大約15-20分鐘后對冷凍液/樣品容器進(jìn)行機(jī)械攪拌(輕彈或輕敲)。

7.儲存:將樣品放入儲存室,在液氮溫度下(低于-130°C)儲存樣品。樣品儲存在-80°C僅建議短期儲存(數(shù)周至數(shù)月)。

8.解凍:在37°C水浴或同類似的機(jī)械解凍裝置中快速解凍樣品,樣品融化時(shí)應(yīng)輕輕地旋轉(zhuǎn)樣品,直到所有可見的冰都融化。在冰凍箱中,1ml樣品的大約解凍時(shí)間為2-3分鐘。不允許樣品在冷凍溫度(0-10°C)以上加熱。冷凍瓶從浴液中取出時(shí),摸起來應(yīng)該是涼的。不建議被動解凍。

9.立即用培養(yǎng)基或等效等滲介質(zhì)稀釋細(xì)胞/冷凍液混合物。稀釋程序可以在一個(gè)步驟中完成。稀釋介質(zhì)應(yīng)在20°C至37°C之間。建議稀釋比為1:10(樣品與介質(zhì))或更大。

10. 應(yīng)用合適的配置下種細(xì)胞。

11.將細(xì)胞放入培養(yǎng)條件或立即使用。

12.解凍后進(jìn)行24小時(shí)生存能力評估。

注:為了獲得低溫保存后細(xì)胞活力的準(zhǔn)確測量,應(yīng)在解凍后24小時(shí)進(jìn)行評估,并與非冷凍對照樣本進(jìn)行比較。

*樣品解凍后立即使用膜完整性指標(biāo)(如臺盼藍(lán))進(jìn)行評估,以比較分析樣品細(xì)胞產(chǎn)量和存活率,這往往導(dǎo)致對細(xì)胞存活率的測量不準(zhǔn)確。

建議采用活/死熒光分析或代謝分析(MTT或alamarBlue*)更準(zhǔn)確地評估可行回收率。

CryoStor產(chǎn)品在環(huán)境溫度下運(yùn)輸。收到后,保存在2°-8°C,避光,直到準(zhǔn)備使用





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