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化工儀器網>產品展廳>技術服務>細胞生物學服務>細胞培養服務>CL020008 SiHa 人子宮頸鱗癌細胞

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CL020008 SiHa 人子宮頸鱗癌細胞

參考價1350.00
具體成交價以合同協議為準
規格
T251350.00元10000 瓶可售

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聯系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!


立譜沃生物(LeapWal Biotech):


湖南立譜沃生物科技有限公司(Hunan LeapWal Biotech Co., Ltd.)是一家從事研發和銷售核酸遞送創新試劑的生物科技公司,致力于成為向科學研究、生物制品生產以及治療領域提供核酸遞送載體的主要供應商。公司在長沙、廣州、上海、浙江設有標準實驗室、生產工廠和辦事處。目前,我們的產品和服務已經應用于多個科研機構、高校、醫院,服務全國的科研人員。



LeapWal™ BIOTECH 品牌優勢:


立譜沃生物(LeapWal™ BIOTECH)目前重點開發PolyShooter™基于陽離子高分子聚合物的新型轉染試劑和ViralStars™病毒介導的基因輸送載體。


(1)PolyShooter™新型轉染試劑系列產品,致力于在科學研究、生物生產和治療領域開發創新型核酸體內、體外和離體傳輸解決方案,提供多種 DNA、siRNA/miRNA、mRNA、RNP、蛋白/多肽等高效轉染試劑,使您能夠在各種貼壁和懸浮哺乳動物細胞、原代細胞、干細胞、難轉染細胞中達到所需的蛋白質表達水平,廣泛應用于基因調節、基因功能研究、表型分析、功能恢復、通路分析、體內敲除、藥物靶點發現、大規模純化用蛋白和下游應用蛋白生產。


(2)ViralStars™慢病毒載體系列產品,為客戶提供高滴度慢病毒載體的包裝、濃縮、保存、感染、篩選的完整解決方案,制備的高滴度慢病毒具有非常高的輸送效率,可以保證基因的長期穩定表達。



經營理念:


“以科技為根本,造就優秀人才”

“以用戶為宗旨,力爭行業先鋒”

“以創新為導向,開拓全球市場”









慢病毒,穩定細胞株,基因編輯,轉染試劑,慢病毒試劑,細胞凍存液,蛋白/免疫學試劑,實驗耗材

SiHa 人子宮頸鱗癌細胞

(Human Cervical Squamous Cell Carcinoma)

SiHa.jpg


SiHa 人子宮頸鱗癌細胞

一、T25 細胞收到后處理

1、觀察

細胞在培養瓶中培養至狀態良好后灌滿完*培養基并密封好瓶口是細胞運輸的最好辦法。收到細胞后,請

先打開外包裝,及時核對培養瓶上標注的細胞名稱是否與訂購的細胞名稱一致,并仔細查看培養瓶是否有

破損或漏液等異常情況,如有破損或漏液等異常情況,請立即拍照,并聯系工作人員處理。

2、處理

(1)75%酒精棉球擦拭 T25 細胞培養瓶外部。

(2)待酒精揮發完*,在顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(40x,100x,200x,

各三張)。前三天的細胞照片為重要的售后依據,不提供照片默認收到時細胞狀態良好。

(3)不要打開培養瓶蓋,將細胞放入培養箱中靜置 2-4 小時后再做處理,以穩定細胞狀態。

(4)查看細胞說明書,按照細胞說明書中描述的培養參數進行常規細胞培養操作(見“細胞說明書”第一

頁)。 ? 貼壁細胞

? 未超過 80%匯合度時,將培養瓶中的完*培養基收集至 50mL 離心管中(對比培養使用),留大約

7mL 完*培養基在細胞培養瓶中,放入培養箱中繼續培養。

? 超過 80%匯合度時,將培養瓶中的完*培養基收集至 50mL 離心管中(對比培養使用),根據情況進

行傳代或者凍存,具體操作見細胞培養步驟。首*傳代,建議 1:2 進行傳代(分兩個 T25)。傳代時

建議一瓶用原瓶中的完*培養基,另外一瓶用自行配制的完*培養基,二者進行對比培養。

? 若細胞貼壁不牢,在運輸過程中容易發生細胞脫落,這是正常現象。請將培養瓶中所有培養液收集至

50mL 離心管,1000rpm 離心 5 分鐘,收集上清(對比培養使用),往細胞沉淀中加入胰,酶 1-2mL,

輕輕吹打,重懸,消化 1-2 分鐘后,加入 5mL 完*培養基終止消化。1000rpm 離心 5 分鐘,棄去上

清,加入 1-2mL 完*培養基重懸細胞。然后按 1:2 的比例進行傳代(分兩個 T25),補充完*培養基

至 5-8mL/瓶,放入細胞培養箱中培養。 二、凍存細胞收到后處理

1、觀察

收到細胞后,請檢查外包裝情況和箱內是否還有干冰。如有外包裝破損、干冰已完*揮發等問題,請立即

拍照,并聯系工作人員處理。

2、處理

(1)迅速將細胞取出轉移至液氮保存,建議盡早復蘇。

(2)復蘇第一管如有細胞活性問題,請對細胞進行不同倍數拍照(40x,100x,200x,各三張),并及時

聯系工作人員處理,后續會有技術人員與您溝通指導后再復蘇第二管。特別說明:未與我方聯系擅自復蘇

第二管,出現問題不予售后。

三、細胞復蘇

(1)確認水浴鍋已升溫至 37℃,取 5mL 預熱的完*培養基于 15mL 離心管中待用。

(2)從液氮中取出細胞凍存管(注意:佩戴防爆面具),快速將其置入 37℃水浴中解凍,直至凍存管中

無結晶,然后用 75%的酒精擦拭凍存管外壁。

(3)將凍存管中的細胞轉移至含 5mL 完*培養基的 15mL 離心管中,1000rpm 離心 5 分鐘。

(4)棄盡上清,細胞沉淀用 1-2mL 完*培養基重懸,接種至 T25 培養瓶,補充完*培養基至 5-8mL/瓶,

放入細胞培養箱中培養。

(5)貼壁 5 小時以上或次日,更換新鮮的完*培養基繼續培養。 四、細胞傳代

(1)細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。首先,棄去培養上清,用 PBS 漂洗細胞 1-2 次。

(2)加入 1-2mL 消化液,置于培養箱中消化適當時間,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部

分變圓并脫落,即消化完*,將細胞迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入與消化液等體積的含 10%血

清的完*培養基終止消化。

(3)輕輕吹打細胞,待細胞完*脫落后轉移至 15mL 離心管,1000rpm 離心 5 分鐘。

(4)棄去上清液,然后按推薦比例進行分瓶傳代(收到細胞后首*進行傳代,推薦 1:2 比例進行分瓶傳

代),補充完*培養基至 5-8mL/瓶。

(5)放入細胞培養箱中繼續培養。 五、細胞凍存

(1)細胞生長狀態良好,細胞密度達 80%-90%,即可進行細胞凍存。首先,棄去培養上清,用 PBS 漂洗

細胞 1-2 次。

(2)加入 1-2mL 消化液,置于培養箱中消化適當時間,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部

分變圓并脫落,即消化完*,將細胞迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入與消化液等體積的含 10%血

清的完*培養基終止消化。

(3)輕輕吹打細胞,待細胞完*脫落后轉移至 15mL 離心管,1000rpm 離心 5 分鐘。

(4)棄去上清液,往細胞沉淀中加入 1mL/支的立譜沃無血清凍存液(貨號:PZ110R),混勻后加入凍存

管中,并做好標記。

(5)將凍存細胞直接放入-80℃冰箱即可(如果追求更理想的細胞復蘇率,也可選擇使用程序降溫盒),

24 小時后轉入液氮中長期儲存,并做好儲存記錄。




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