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靶基因甲基化測序(Target-BS)

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深圳市易基因科技有限公司(簡稱易基因,E-GENE Co.,Ltd.)專注表觀組學十余年,以“表觀遺傳學科學研究與臨床應用”為愿景,依托高通量測序技術和云數據分析平臺。為醫療機構、科研機構、企事業單位等提供以表觀遺傳學技術為核心的多組學科研服務及解決方案,全面覆蓋針對生命科學基礎研究、醫學及臨床應用研究等內容。


易基因專注表觀組學十余年,多組學科研服務。技術團隊在國際上LHC-BS、HMST-seq、ChIP-BS、cfDNA-TBS等甲基化、羥甲基化技術流程,研發建立簡化基因組甲基化dRRBS、cfDNA-RBS,單細胞/微量DNA全基因組甲基化及簡化高通量甲基化測序技術,RNA甲基化測序等技術和方法,并建立易基因科技全自動化彈性資源生信分析系統。在Nature、Lancet、Science、Nat Commun、 Cell Res、Genome Biol、Blood、PloS Genet、Epigenetics、Epigenomics 、Clin Epigenetic等期刊發表論文100余篇,申請發明12項、軟件著作權27項。



T:0755 - 28317900 

V:181 2416 7839

生命科學及生物技術研發和推廣,生物技術服務

大家好,這是專注表觀組學十余年的易基因。




對目標基因/CpG 位點甲基化檢測,建立靈活的靶向甲基化測序技術。


易基因建立的靶基因甲基化高通量測序(Target Bisulfite sequencing,Target-BS)是針對已有目標基因panel組合,運用易基因自主研發的甲基化特異性多重PCR引物設計軟件,對亞硫酸鹽轉化后的目標基因多重擴增,建庫后進行超高深度(1000X以上)甲基化精準檢測。






應用方向:

Target-BS廣泛用于已知位點的甲基化Biomarker篩選、驗證及臨床轉化應用

  • 后續目標基因的甲基化驗證




技術優勢:

  • 多基因多重擴增,檢測通量高;

  • 超高深度亞硫酸鹽甲基化測序,相對于傳統BSP克隆測序,檢測靈敏度、準確性高,可準確檢測到樣本中低于1%的甲基化水平;

  • 樣本需求量低,20ng基因組DNA可實現多基因擴增;

  • 適用范圍廣,對基因組DNA、FFPE樣本、游離cfDNA等樣本均適用;

  • 檢測費用顯著低于現有技術、快周期。






技術路線:

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實驗策略:

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分析內容:

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送樣要求:



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經典案例:

參考文章

Vitamin C Prevents Offspring DNA Methylation Changes Associated with Maternal Smoking in Pregnancy

靶基因DNA甲基化測序驗證補充維C可減少后代因母親妊娠期吸煙而發生的DNA甲基化變化


背 景:

妊娠期吸煙可能導致嬰兒出生后終生肺功能下降。此前已有不少研究描述了孕婦吸煙相關的的DNA甲基化變化,如在分娩時的胎盤和臍血、胎兒肺以及兒童時期的口腔上皮和血液中。本研究為確定補充維生素 C 是否會減少后代因母親因妊娠期吸煙而發生的甲基化變化。


方 法:

對胎盤、臍帶血樣本和口腔樣本進行靶向重亞硫酸鹽測序,然后使用靶基因DNA甲基化測序對選定的臍帶血差異甲基化區域進行獨立驗證。




結論:

安慰劑組和非吸煙者組之間甲基化差異≥10%的大多數CpG(69.03%)在補充維生素C后,至少50%可恢復到非吸煙者水平。恢復的CpG中有相當一部分與低甲基化CpG富集程度較高的表型結果相關。

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靶基因DNA甲基化測序覆蓋的所有321個CpG是平均覆蓋深度的 337 倍



Target-BS用于甲基化多位點甲狀腺結節診斷

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Target-BS發現食管鱗癌甲基化 biomarker

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參考文獻:


①Targeted bisulfite sequencing identified a panel of DNA methylation-based biomarkers for esophageal squamous cell carcinoma (ESCC),DOI 10.1186/s13148-017-0430-7

②Identification of Tissue-Specific DNA Methylation Signatures for Thyroid Nodule Diagnostics,DOI: 10.1158/1078-0432.CCR-18-0841

③Investigation of measurable residual disease in acute myeloid leukemia by DNA methylation patterns,doi.org/10.1038/s41375-021-01316-z




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