裸鼠爪墊淋巴道轉移模型的造模方法如下:
以人結腸癌細胞HCT-116為例:
選擇實驗動物:Balb/C裸鼠。在實驗開始前需要進行適應性培養7天。適應性飼養結束后在無菌條件下,用1%的2-Chlorotrityl chloride-2-甲氨基環己酮以0.3mL/只腹腔麻醉35只Balb/C裸鼠,5min麻醉起效后,消毒裸鼠右后肢爪墊皮膚,將0.04mL(4×106個)的HCT-116細胞懸液用2號針頭緩慢注射于裸鼠右后肢爪墊皮下,直到可見局部形成隆丘后退針,之后使用綿簽壓迫針孔處防止細胞滲漏。
為12~14mm,打結后可見左室前壁及心尖部顏色變暗、搏動減弱。結扎滿意后用0號絲線關閉胸腔,生理鹽水沖洗確認閉合完好,然后依次縫合肌肉及皮膚。術后單籠飼養,肌注PG預防感染。
分子實驗平臺:高效運作了qRT-PCR、Western blot、雙向電泳技術、分子克隆與質粒構建、流式細胞儀檢測、免疫共沉淀、染色質免疫共沉淀、RNA免疫沉淀、凝膠電泳遷移實驗、酶聯免疫吸附測定、外泌體抽提及鑒定等實驗。
基因組學平臺:可以完成甲基化檢測、基因芯片分析、高通量測序等實驗。
蛋白組學平臺:能實現LC-MS、ITRAQ、蛋白質修飾分析等重點實驗項目。
病理學平臺:涉及免疫熒光染色、免疫組織化學染色、HE染色、特殊染色等實驗。
臨床前CRO服務:主要提供呼吸系統、神經系統、免疫系統性疾病的藥效學評價服務,包括靶點驗證、體內外模型的構建、藥物篩選、藥物分析、藥效性評價、藥代
動力學和藥理學研究以及院內制劑研發等。
項目轉化服務:助力客戶進行方案設計、聯合課題申報、藥物項目引進和孵化,解決客戶對實驗技術平臺、專業人和融資的需求。