局灶性腦缺血/再灌注損傷模型造模方案:
禁食12h(不禁水)左右的SD大鼠麻醉后取仰臥位,去除頸前被毛、常規消毒后,頸部正中切口,仔細分離左側的頸總動脈(CCA),避免損傷迷走神經及頸交感干,并向上分離出頸外動脈(ECA)和頸內動脈(ICA)。在距離CCA分叉較遠處用醫用縫合線結扎CCA和ECA,將CCA和ICA拉成一直線,用*脈夾暫時阻斷ICA血流,在CCA血管壁上剪一小口,把粗細適中的線栓自CCA切口插入,沿著CCA分叉處緩慢插入ICA,遇有輕微阻力即停止,此時線栓的膨大頂端即堵塞大腦中動脈的開口,在用縫合線固定住線栓,常規消毒后全層縫合皮膚切口。假手術組動物手術步驟類似,但未作線栓閉塞中動脈。造模后的大鼠輕輕的轉移到鼠籠里,平躺在適溫墊料上以保持大鼠正常體溫。
栓塞2h后緩慢拔出一部分線栓,使線栓頂端不再閉塞中動脈,讓缺血側腦部血液再灌注。再灌注1h后對大鼠進行神經功能評分,屏風方法按照Longa法神經行為缺損評分標準:沒有神經損傷計為0分;不能伸出左前爪(輕微神經損傷)記為1分;向左繞圈(中度神經損傷)記為2分;向左邊傾斜(重度神經損傷)記為3分;不能自主行走或失去知覺記為4分。神經功能缺損評分在2~3分視為模型成功。
分子實驗平臺:高效運作了qRT-PCR、Western blot、雙向電泳技術、分子克隆與質粒構建、流式細胞儀檢測、免疫共沉淀、染色質免疫共沉淀、RNA免疫沉淀、凝膠電泳遷移實驗、酶聯免疫吸附測定、外泌體抽提及鑒定等實驗。
基因組學平臺:可以完成甲基化檢測、基因芯片分析、高通量測序等實驗。
蛋白組學平臺:能實現LC-MS、ITRAQ、蛋白質修飾分析等重點實驗項目。
病理學平臺:涉及免疫熒光染色、免疫組織化學染色、HE染色、特殊染色等實驗。
臨床前CRO服務:主要提供呼吸系統、神經系統、免疫系統性疾病的藥效學評價服務,包括靶點驗證、體內外模型的構建、藥物篩選、藥物分析、藥效性評價、藥代動力學和藥理學研究以及院內制劑研發等。
項目轉化服務:助力客戶進行方案設計、聯合課題申報、藥物項目引進和孵化,解決客戶對實驗技術平臺、專業人和融資的需求;