膠原誘導小鼠關節炎動物模型構建方法
膠原誘導小鼠關節炎模型是一種常用的自身免疫性關節炎動物模型,它能夠模擬人類類風濕關節炎的特征,包括滑膜炎、關節軟骨破壞和骨質侵蝕等。
以下是膠原誘導小鼠關節炎動物模型構建的詳細步驟:
1.實驗動物準備:選擇適合的小鼠品系,如DBA/1或B10.RIII,這些品系對CIA較為敏感。通常使用7-8周齡的雄性或雌性小鼠。
2.膠原和佐劑準備:將Ⅱ型膠原溶解在0.1M的醋酸中,制備成2-4mg/ml的溶液,并在4°C過夜以充分溶解。將wanquan弗氏佐劑(CFA)與膠原溶液混合,使用高
速攪拌器進行乳化,以形成穩定的乳劑。
3.免疫注射:首先進行初始免疫,將乳劑通過尾根部皮內注射給小鼠。大約21天后進行加強免疫,通常使用不wanquan弗氏佐劑(IFA)作為佐劑。
4.模型評估:從免疫后開始定期觀察小鼠的臨床癥狀,如關節炎評分、體重變化、活動能力等??梢酝ㄟ^關節X光、MRI或組織病理學檢查來評估關節炎的發展和關節
損傷程度。
5.注意事項:在實驗過程中,應嚴格遵守動物福利和倫理準則。實驗操作應在專業人員的指導下進行,以確保動物安全和實驗數據的準確性。
根據最新的研究和實驗方案,CIA模型的構建方法已經相當標準化,但仍需根據實驗的具體要求進行適當調整。例如,不同的小鼠品系可能需要不同的免疫策略和評估
方法.
參考:
[1]Wu J, Feng Z, Chen L, et al. TNF antagonist sensitizes synovial fibroblasts to ferroptotic cell death in collagen-induced arthritis mouse models[J].
Nat Commun, 2022,13(1):676.